導航：安全管理網>> 安全論文>> 食品安全論文>>正文

免疫膠體金快速檢測水產品中孔雀石綠殘留的質量分析和評價

文檔作者：劉歡1 郭萌萌2 李晉成1 吳立冬1 許玉艷1 李強1 馬兵1? 文檔來源： 1. 中國水產科學研究院質量與標準研究中心 2.黃海水產研究所國家水產品質量監(jiān)督檢驗中心?		點擊數：	更新時間： 2025年07月16日
下載地址：點擊這里	文件大小： 684.48 KB 共8頁	文檔格式： PDF	下載點數： 1 點（VIP免費）

全屏查看

內容預覽 [文件共8頁]

本文件共8頁，如需編輯使用，請下載。

注：預覽效果可能會出現部分文字亂碼（如口口口）、內容顯示不全等問題，下載是正常的。

	文件大?。?84.48 KB 共8頁文件格式：PDF 下載點數：1 點（VIP會員免費）

下一篇：美國食品添加劑的安全監(jiān)管及其啟示

上一篇：農產品質量安全檢驗檢測體系建設的若干問題

文本預覽

僅提取頁面文字內容，供快速閱讀使用。

第6 卷? 第5 期? 食品安全質量檢測學報? Vol.?6 ?No.?5?
2015 年5 月? Journal?of?Food?Safety?and?Quality?May ,?2015?
?
? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
基金項目: 國家自然科學基金資助項目(20907051);? 中央級公益性科研院所基本科研業(yè)務費專項資金資助項目(2013C006)。?
Fund: Supported?by?the?National?Natural?Science?Foundation?of?China?(20907051);?the?Special?Scientific?Research?Funds?for?Central?Non-Profit?
Institutes,?Chinese?Academy?of?Fishery?Sciences?(2013C006).?
*通訊作者: 劉歡,? 副研究員,? 主要研究方向為水產品質量安全監(jiān)管及檢測技術研究。E-mail:?liuh@cafs.ac.cn?
*Corresponding author: LIU?Hua n,?A ssociate?Pr ofessor,?Q uality?a nd? Standards?R esearch? Center? of?Chinese?Aca demy?of?Fi shery?Sci ences,?
No.150,?Yongding?Road,?Fengtai?District,?Beijing?100141,?China.?E-mail:?liuh@cafs.ac.cn?
免疫膠體金快速檢測水產品中孔雀石綠殘留的
質量分析和評價
劉? ? 歡1*,? 郭萌萌2,? 李晉成1,? 吳立冬1,? 許玉艷1,? 李? ? 強1,? 馬? ? 兵1?
(1.? 中國水產科學研究院? 質量與標準研究中心? 北京?? 100141;??
2.? 黃海水產研究所? 國家水產品質量監(jiān)督檢驗中心? 青島?? 266071)?
摘要: 目的為推動免疫膠體金類現場快速檢測技術在水產品藥物殘留監(jiān)管領域中的應用。方法? ? 本研究采
用一套“盲樣式”免疫膠體金類快速檢測產品質量評價方法,? 對10 種市售的用于檢測水產品中孔雀石綠殘留
的國產膠體金快速檢測產品的假陽性率、假陰性率、檢出率及穩(wěn)定性等指標進行驗證。結果? ? 結果顯示,? 有3
種產品能100%準確檢測出84 個魚糜樣品中是否殘留孔雀石綠,? 且2 個不同批次產品的檢測結果一致;? 另外7
種產品檢出假陽性或假陰性樣品,? 且2 個不同批次間產品的穩(wěn)定性有差異。結論? ? 將此類產品應用于水產品質
量安全監(jiān)管之前,? 有必要對其最低檢出限、假陽性率、假陰性率、穩(wěn)定性等參數進行驗證,? 以確保檢測結果的
科學性和公正性。?
關鍵詞: 孔雀石綠;? 免疫膠體金類快速檢測產品;? 分析評價;? 假陽性率;? 假陰性率?
Evaluation of qualities of colloidal gold rapid detection kits for malachite
green in seafood
LIU?Huan1*,?GUO?Meng-Meng2,?LI?Jin-Cheng1,?WU?Li-Dong1,?XU?Yu-Yan1,?LI?Qiang1,?MA?Bing1?
(1.?Quality and Standards Research Center,?Chinese Academy of Fishery Sciences,?Beijing?100141,?China;?2.?National
Aquatic Products Quality Supervision and Inspection Center,?Qingdao?266071,?China)
ABSTRACT: Objective To?prom ote?the ?applic ation?o f?collo idal?gol d?rap id?de tection?kits? in?sea? food?
residual?regulation.?Methods? ? Ten?kinds?of?rapid?detection?products?which?were?used? to?detect?the?residue?of?
malachite?green?we re? tested? and?eva luated? by?a ?kin d?o f?b lind?sam ple?testing?m ethod,? which? included?fa lse?
positive? rate?(FPR),? false?ne gative?ra te?(F NR),?and ?the ?l owest?de tectable?l imit?(LDL).? Results?? The? results?
showed?that?only?3?k inds?of?product?could?detect?the?malachite?green?residues?in?8 4?fish?samples?exactly,?and?
there?was?no?difference?between?the?2?results?using?different?batch?of?products.?The?other?products?detected?the?
false?posit ive/? negative?sam ples,? there?were ? different? stability? in?FPR /?FN R?of? these?pro ducts?w hen?usi ng?2 ?
batches?of?products.?Conculusion? ? The?results?suggest?that?it?is?necessary?to?evaluate?the?LDL,?FPR?and?FNR?
to?ensure?the?impartiality?of?the?test?results?before?application.?
KEY WORDS: malachite?green;?co lloidal?gold?rapid?detection?products;?evaluation;?false?positive?rate;?false?
1676? 食品安全質量檢測學報? 第6 卷?
?????
?
negative?rate?
??
1? ? 引? ? 言?
孔雀石綠是一種合成的三芳基甲烷工業(yè)染料,?
因其具有較強的殺菌、殺蟲作用,? 特別是對抑制真
菌、霉菌效果好,?1936 年以來在水產養(yǎng)殖業(yè)中被用于
消毒,? 主要用于殺滅霉菌和魚體外的寄生蟲等。孔雀
石綠在生物體內被迅速轉化成無色孔雀石綠,? 無色
孔雀石綠與蛋白質緊密結合而具有較長的消除半衰
期,? 且半衰期隨生物種類和環(huán)境條件變化而不同[1]。
從20 世紀90 年代開始,? 國內外學者陸續(xù)發(fā)布的研究
結果指出孔雀石綠在魚體內和環(huán)境中殘留時間長,?
具有潛在的致癌、致畸和致突變等危險,? 因此,? 被許
多國家和地區(qū)列為水產養(yǎng)殖禁用藥物。如加拿大于
1992 年禁止將其作為漁場殺菌劑,? 規(guī)定在食用水產
品中禁止檢出;? 歐盟于2002 年6 月頒布法令禁止在
漁場中使用孔雀石綠;? 我國農業(yè)部在2002 年12 月第
235 號公告《動物性食品中獸藥最高殘留限量》中規(guī)
定孔雀石綠為禁用藥物,? 在動物性食品中不得檢出
[2-5]。2005 年6 月,? 英國超市從其出售的來自中國的
養(yǎng)殖鱖魚體內檢出孔雀石綠,? 隨后,? 日本、歐盟、中
國香港等國家和地區(qū)也紛紛從我國出口的鰻魚中檢
出孔雀石綠藥物殘留,? 導致我國的鰻魚出口大幅度
下降,? 水產品中的孔雀石綠殘留問題對我國漁業(yè)產
業(yè)的發(fā)展帶來巨大的經濟損失[1]。近年來,? 水產品中
孔雀石綠殘留問題一直是我國水產品質量安全監(jiān)管
的重點,? 在農業(yè)部近年印發(fā)的農產品質量安全專項
整治方案中均將水產品中孔雀石綠殘留問題作為專
項整治重點[6,7]。然而,? 從國家相關部委近年公布的水
產品質量安全監(jiān)測結果中發(fā)現,? 在生產過程中仍存
在違規(guī)添加孔雀石綠致使個別品種中檢測出孔雀石
綠[8]?！靶《ⅰ笔俏覈乃a養(yǎng)殖生產經營的主要
特點,? 水產品質量安全監(jiān)管部門要面對以家庭為單
位的千家萬戶式監(jiān)管對象,? 水產品加工業(yè)同樣面對
來自數以千計甚至萬計的養(yǎng)殖戶生產的水產品作為
加工原料,? 因此,? 面對龐大的監(jiān)管和質量控制對象,?
具有檢測速度快、結果準且操作步驟簡單等特點的現
場快速檢測產品將成為行業(yè)監(jiān)管以及企業(yè)生產控制
的有效工具[9]。?
基于膠體金免疫層析技術(gold?imm uno?
chromatographic?assay,?GICA)開發(fā)出的商品化獸藥殘
留快速診斷試紙條/卡(簡稱“膠體金試紙條/卡”)具
有便于攜帶、可直接在生產或銷售現場出具檢測結
果、且可肉眼判斷等特點,? 較為滿足行業(yè)主管部門以
及大型企業(yè)開展獸藥殘留監(jiān)控管理的工作需要[10-19]。
目前,? 國外已有相當成熟的商品化試紙條,? 如美國的
Chram?Science? Inc.公司研發(fā)的一系列用于檢測牛奶
中各種抗生素的免疫紙層析膠體金試紙條ROSA 系
列[20]。在國內商品化的免疫膠體金試紙條/卡的研發(fā)
與生產發(fā)展迅猛,? 已有多家專注于研發(fā)和生產食品
安全快速檢測產品的企業(yè),? 國產的部分商品化試紙
條產品已廣泛用于牛奶中三聚氰胺、畜牧產品中萊克
多巴胺、蜂蜜產品中四環(huán)素、磺胺等藥物殘留的檢測。
在應用快速檢測產品檢測水產品中禁用藥物殘留方
面,? 目前商品化的免疫膠體金試紙條/卡產品主要有
用于檢測水產品中氯霉素、硝基呋喃類代謝物和孔雀
石綠殘留,? 但此類快速檢測產品在實際生產和監(jiān)管
中應用并不廣泛,? 產品質量不穩(wěn)定是限制其廣泛應
用的原因之一[21,22]。本課題組曾建立了一套“盲樣式”
免疫膠體金類快速檢測產品質量評價方法,? 并用此
方法對水產品中氯霉素和硝基呋喃類代謝物的免疫
膠體金類快速檢測產品進行質量分析和評價,? 發(fā)現
驗證的快速檢測產品存在技術成熟度不足、質量參差
不齊問題[9,23]。為進一步推動該類產品在水產品藥物
殘留監(jiān)管領域的應用,? 本研究繼續(xù)對商品化程度較
高的孔雀石綠快速檢測產品的質量進行分析和評價,?
選取10 種市售的可用于現場檢測水產品中孔雀石綠
殘留的國產免疫膠體金快速檢測產品(簡稱“孔雀石
綠快檢產品”),? 通過實驗驗證其假陽性率、假陰性
率、實際樣品檢出率等技術指標,? 以期客觀地分析和
評價當前國內市場上此類產品的質量狀況,? 為從事
水產品中藥物殘留監(jiān)管的工作人員、水產品養(yǎng)殖和加
工企業(yè)或個人應用此類產品提供參考。?
2? ? 材料和方法?
2.1 實驗材料?
實驗用10 種孔雀石綠快檢產品分別從各自生產
企業(yè)的庫房中隨機抽取,? 為避免影響公司的經營情
況,? 本文將用1 至10 號產品分別表示10 種孔雀石綠
第5 期? 劉? ? 歡,? 等:? 免疫膠體金快速檢測水產品中孔雀石綠殘留的質量分析和評價?1677 ?
?????
?
快檢產品。每種產品抽取2 個不同批號的樣品,? 每個
批號抽樣數量為45 個,? 每種產品共抽樣90 個,? 密封
包裝;? 本次實驗用的10 種孔雀石綠快檢產品檢測的
是水產品中孔雀石綠和隱性孔雀石綠總量。實驗用陰
性鯉魚(青島市平度尹府水庫,? 于30?m in 內用冰儲運
至實驗室)。?
2.2 ? 試劑與設備?
有色孔雀石綠、隱色孔雀石綠、有色結晶紫、隱
色結晶紫及其同位素內標標準品(純度≥95%,?Sigma);
乙腈、甲醇均為色譜純(Thermo?Fis her),? 二氯甲烷、
無水乙酸銨、冰乙酸等試劑均為分析純(上海國藥集
團)。?
液相色譜-串聯質譜儀(美國Thermo?Finn igan?
TSQ?Quantum?Access)、AB265-S 型電子分析天平(瑞
士Mettler?toledo 公司)、H-2050R 型離心機(湖南湘儀
集團)、T-18 型均質機(德國IKA)、N-EVAP?24 型氮
吹儀(美國Organomation 公司)。?
2.3 ? 試驗方法?
2.3.1?? 空白基質樣品制備?
魚,? 去鱗、去皮,? 沿脊背取肌肉。樣品均質混勻,?
-18? ℃以下冷凍保存?zhèn)溆?。采用GB/T?19857-2005《水
產品中孔雀石綠和結晶紫殘留量的測定》方法測? ? ?
定[24],? 制備的鯉魚基質中均不含孔雀石綠、隱性孔雀
石綠、結晶紫及隱性結晶紫殘留。稱取空白基質樣品
400 個,? 編號后置于-18? ℃冰箱中保存。?
2.3.2?? 加標樣品制備?
依照各產品說明書中標識的稱樣量,? 準確稱取
空白鯉魚基質400 個,? 并向其中添加隱色孔雀石綠標
準品,? 添加水平為各產品說明書中標識的檢測限濃
度,? 不同添加水平的加標樣品數量分別為:?0.5? μg/kg
的加標樣品80 個、1.5?μg/kg 的的加標樣品40 個、2.0?
μg/kg 的加標樣品280 個。各產品標識的稱樣量及檢
測限詳見表1,? 編號后置于-18? ℃冰箱中保存。?
2.3.3?? 實際陽性樣品制備?
采用本實驗室留存的鱖魚陽性樣品作為實際陽
性樣品,? 采用GB/T?19857-2005 方法測定[24],? 鱖魚陽
性樣品隱色孔雀石綠含量約為5.00?μg/kg。依照各產
品說明書中標識的稱樣量,? 準確稱取鱖魚陽性樣品
50 個,? 編號后置于-18? ℃冰箱中保存,? 備用。?
2.3.4?? 內標標準工作液的制備?
準確稱取適量孔雀石綠、隱色孔雀石綠、結晶紫、?
表1? ? 10? 種孔雀石綠快檢產品標識檢出限及稱樣量?
Table 1 The lowest detection limit and sample weight of
10 kinds of rapid detection products
產品? 檢出限/μg/kg? 稱樣量/g?
1 號? 2.0?1. 0?
2 號? 0.5?5. 0?
3 號? 2.0?5. 0?
4 號? 2.0?3. 0?
5 號? 2.0?5. 0?
6 號? 0.5?5. 0?
7 號? 2.0?3. 0?
8 號? 2.0?3. 0?
9 號? 2.0?5. 0?
10 號? 1.5?5. 0?
?
隱色結晶紫、同位素內標氘代孔雀石綠、同位素內標
氘代隱色孔雀石綠等標準品,? 用乙腈分別配成100?
μg?/mL 的標準儲備液,?-18? ℃避光保存。分別準確吸
取孔雀石綠、隱色孔雀石綠、結晶紫、隱色結晶紫標
準儲備液至100?m L 容量瓶中,? 用乙腈稀釋至刻度,?
制備成1.0? μg/mL 的標準使用液,? 然后將標準使用液
稀釋配制成相應濃度的標準工作溶液。用乙腈稀釋同
位素內標溶液,? 將其配制為1? μg/mL 的內標標準工? ?
作液。?
2.3.5?? 孔雀石綠快檢產品的評判?
實驗方法參照劉歡等[9,23]并略作修改,? 具體為:?
檢測人員使用2 個批號的孔雀石綠快檢產品現場檢
測84 個魚糜樣品(每個批號產品檢測42 個樣品,? 包
含20 個空白、20 個加標陽性和2 個實際陽性樣品)
中孔雀石綠的殘留水平,? 判讀人員現場依據各孔雀
石綠快檢產品說明書中描述的“結果判讀原則”,? 肉
眼判斷檢測結果,? 并統(tǒng)計、計算該產品的假陽性率、
假陰性率、檢出率等指標。魚糜樣品由本實驗室技術
人員在現場驗證實驗前24?h 進行制備和編號,? 加標
陽性樣品中隱色孔雀石綠的添加水平均為各產品標
識的最低檢出限。參與魚糜樣品制備和編號的工作人
員均不參與結果判讀。?
(1)? 現場檢測人員和判讀人員篩選和培訓?
現場檢測人員由各產品生產企業(yè)選派的技術人
員擔任,? 均十分熟悉各自產品的檢測實驗操作方法;?
檢測結果判讀人員由5 名從事水產品質量安全監(jiān)管
1678? 食品安全質量檢測學報? 第6 卷?
?????
?
或檢測技術研究和開發(fā)的志愿者組成,? 對現場檢測
人員和判讀人員的篩選和培訓參照劉歡等[23]方法。
經培訓后,? 他們在檢測結果讀取準確性檢驗中正確
率均達到100%。?
(2)?? 結果判讀、統(tǒng)計和計算?
檢測結果分陰性、陽性和無效3 種,? 判讀人員依
照各孔雀石綠快檢產品說明書中描述的“結果判讀原
則”觀察檢測結果,? 并進行結果讀取和記錄。每個樣
品的最終檢測結果以3/5 以上判讀人員讀取結果計,?
具體為:? 當3 個以上判讀人員對樣品的判讀結果為陰
性,? 則該樣品的最終檢測結果為陰性;? 當3 個以上判
讀人員對樣品的判讀結果為陽性,? 則該樣品的最終
檢測結果為陽性;? 當2 個判讀人員對樣品的判讀結果
為陽性、2 個判讀人員對樣品的判讀結果為陰性、1
個判讀人員對樣品的判讀結果為無效、則該樣品的最
終檢測結果為無效。根據最終結果計算各孔雀石綠快
檢產品的假陽性率、假陰性率和檢出率。?
假陰性率=假陰性樣品檢出數量/樣品數量×100%?
假陽性率=假陽性樣品檢出數量/樣品數量×100%?
檢出率=陽性樣品檢出數量/陽性樣品數量×100%?
3? ? 結果與分析?
3.1 假陽性率?
2 個不同批號的10 種孔雀石綠快檢產品檢測空
白魚糜樣品的實驗結果詳見表2。實驗結果顯示:?2
個不同批號的1、3、4、5、6 號產品假陽性率均為
0,? 說明該產品均能準確地檢測孔雀石綠陰性樣品,?
且產品穩(wěn)定性較好、無批間差異;?2 號產品2 個批次
的假陽性率均為5%;?7 號和8 號產品至少有1 個批次
產品檢測孔雀石綠殘留量的假陽性率大于10%,? 且2
個批次的檢測結果均有差異,? 說明上述產品檢測孔
雀石綠陰性樣品仍存在批間差異;?9 號和10 號產品的
假陽性率較高,? 尤其是9 號產品,? 該產品批次1 的假
陽性率為75%,? 批次2 為0,? 說明上述產品檢測孔雀
石綠陰性樣品的準確性較差,? 且2 個批次產品的檢測
結果穩(wěn)定性較差。?
3.2 假陰性率? ?
2 個不同批號的10 種孔雀石綠快檢產品檢測加
標魚糜樣品的實驗結果詳見表3,? 各產品加標濃度分
別為該產品商標標識檢出限。實驗結果顯示:?2 個不
同批號的1、3 和4 號產品檢測孔雀石綠加標樣品的?
表2? ? 10? 種孔雀石綠快檢產品檢測空白魚糜樣品?
實驗結果?
Table 2 The detecting result of blank sample by 10 kinds
of malachite green rapid detection products
產品?
批次1? 批次2?
樣品數量
/個?
假陽性率
/%?
樣品數量/
個?
假陽性率
/%?
1?2 0? 0? 20? 0?
2?2 0? 5? 20? 5?
3?2 0? 0? 20? 0?
4?2 0? 0? 20? 0?
5?2 0? 0? 20? 0?
6?2 0? 0? 20? 0?
7?20 ? 15? 20? 10?
8?20 ? 15? 20? 0?
9?20 ? 75? 20? 0?
10?20 ? 40? 20? 10?
表 3? ? 10 種孔雀石綠快檢產品檢測孔雀石綠加標魚糜?
樣品實驗結果?
Table 3 The detecting result of spiked sample by 10
kinds of malachite green rapid detection products?
產品
加標濃度
/(μg/kg)?
批次1? 批次2?
? ?
樣品數
量/個?
假陰性
率/%?
樣品數
量/個?
假陰性
率/%?
1?2? 20? 0? 20? 0?
2?0 .5? 20? 0? 20? 5?
3?2? 20? 0? 20? 0?
4?2? 20? 0? 20? 0?
5? 2? 20? 100?2 0?1 00?
6?0. 5? 20? 10? 20? 5?
7? 2? 20? 20?20 ?15 ?
8?2 ? 20? 20? 20? 0?
9?2? 20? 0? 20? 5?
10?1. 5? 20? 5? 20? 40?
?
假陰性率均為0,? 說明當孔雀石綠殘留量高于或等于
3 種產品標識的檢測限時,? 上述3 種產品均能準確地
檢測出陽性樣品,? 且批間穩(wěn)定性較好。2 個不同批號
的5 號產品檢測孔雀石綠加標樣品的假陰性率均為
100%,? 說明該產品靈敏度根本達不到其自身標識的
檢出限,? 其最低檢測濃度與商標標識不符。7 號、8
第5 期? 劉? ? 歡,? 等:? 免疫膠體金快速檢測水產品中孔雀石綠殘留的質量分析和評價?1679 ?
?????
?
號以及10 號產品均有1 個批次的產品假陰性率大于
20%,? 說明產品的靈敏度未達到產品標識的檢出限
濃度要求。?
3.3 實際樣品檢出率?
10 種孔雀石綠快檢產品檢測實際樣品的實驗結
果詳見表4。使用液相色譜-串聯質譜儀檢測實際樣
品中孔雀石綠殘留量約為5.0?μg/kg。使用快檢產品的
檢測結果顯示:? 在孔雀石綠殘留量為5.0? μg/kg 水平
上,?有8 種快檢產品均能準確檢出陽性樣品,? 檢出率
為100%,? 且2 個批號的產品檢測結果相同;? 然而,?1
個批次的5 和7 號產品檢測實際樣品時均出現假陰性
結果,? 此結果與表3 中2 種產品檢測加標魚糜樣品假
陰性率較高的結論基本一致,? 說明該產品檢測陽性
樣品時易檢出假陰性結果。?
3.4 檢測用時及所需輔助儀器設備?
本次驗證的10 種快檢產品在檢測水產品中孔雀
石綠殘留時所需的輔助儀器設備及檢測用時如表5
所示。從表5 中可看出:?3 種快檢產品檢測6 個樣品? ?
?
表4? ? 10 種孔雀石綠快檢產品檢測孔雀石綠陽性魚糜樣品實驗結果?
Table 4 The detecting result of positive sample by 10 kinds of malachite green rapid detection products?
產品? 目標物殘留濃度
/(μg/kg)?
批次1? 批次2?
? ? 樣品數量/個? 檢出率/%? 樣品數量/個? 檢出率/%?
1? 5.0? 2? 100?2?1 00?
2? 5.0? 2? 100?2?1 00?
3? 5.0? 2? 100?2?1 00?
4? 5.0? 2? 100?2?1 00?
5?5 .0? 2? 0? 2? 100?
6? 5.0? 2? 100?2?1 00?
7?5 .0? 2? 50? 2? 100?
8? 5.0? 2? 100?2?1 00?
9? 5.0? 2? 100?2?1 00?
10? 5.0? 2? 100?2?1 00?
?
表5? ? 10 種孔雀石綠快檢產品現場檢測所需輔助設備及用時?
Table 5 The accessory equipment and consuming time by 10 kinds of malachite green rapid detection products
產品? 輔助設備?
檢測用時/min?
按6 個樣品計? 按84 個樣品計?
1? 離心機、空氣吹干儀? 56?23 9?
2? 渦旋儀、離心機、氮吹儀? 65?27 0?
3? 離心機、空氣吹干儀? 94?39 5?
4? 渦旋儀、離心機、空氣吹干儀? 90?31 8?
5? 離心機、空氣吹干儀? 93?36 9?
6? 渦旋儀、離心機、氮吹儀? 55?23 3?
7? 離心機、空氣吹干儀? 70?38 3?
8? 離心機、空氣吹干儀? 94?29 0?
9? 渦旋儀、離心機? 79?31 0?
10? 渦旋儀、離心機、氮吹儀? 67?26 9?
1680? 食品安全質量檢測學報? 第6 卷?
?????
?
的用時均未超過 2?h,? 檢測84 個樣品的用時未超過8?
h,? 而傳統(tǒng)儀器法檢測6 個樣品一般用時為10?h 左右,?
檢測84 個樣品至少需3?d,? 可見使用快檢產品的檢測
用時遠低于傳統(tǒng)儀器法。10 種產品現場檢測時均使
用了一定數量的簡易輔助儀器設備,? 說明本次驗證
的快檢產品較適合在具有簡單試驗條件的場所使用,?
但要實現在養(yǎng)殖池塘邊開展現場快速檢測工作仍需
進一步開發(fā)操作簡單、方便的前處理方法。?
4? ? 討? ? 論?
與傳統(tǒng)儀器檢測方法相比,? 針對現場的快速檢
測方法可以在養(yǎng)殖生產或銷售現場對樣品進行檢測,?
可縮短檢測時間、提高監(jiān)管效率,? 能夠有效地防止問
題產品流入消費市場,? 是一種有效的監(jiān)管手段,? 因此,?
將其應用到實際監(jiān)管工作中,? 快檢產品的質量將直
接影響監(jiān)管的權威性和有效性[25,26]。目前,? 國內常用
液相色譜法(GB/T?20361-2006) [27] 或液質法(GB/T?
19857-2005)[24]檢測水產品中孔雀石綠殘留量,? 兩種
方法的最低檢出限均為0.5? μg/kg。因此,?目前水產
品質量安全監(jiān)管工作中,?0.5?μg/kg 常作為水產品中孔
雀石綠殘留的監(jiān)管值。本次驗證的10 種孔雀石綠快
檢產品中,? 有2 種產品商標標識的最低檢出限為0.5?
μg/kg(2 號和6 號產品)、1 種產品商標標識的最低檢
出限為1.5?μg/kg(10 號產品),? 其余7 種產品商標標識
的最低檢出限均為2.0? μg/kg,? 除2 號和6 號產品外,?
其余產品的最低檢出限均高于儀器法,? 說明目前大
部分基于免疫膠體金技術開發(fā)的孔雀石綠快檢產品
的靈敏度還不能達到傳統(tǒng)儀器法水平。2 號和6 號產
品的最低檢出限為0.5? μg/kg 與常用的儀器法最低檢
出限一致,? 從產品標識的檢出限來看,? 產品2 和6 均
滿足質量安全監(jiān)管需求。然而,? 當魚糜樣品中孔雀石
綠殘留量為0.5?μg/kg 時,?2 個不同批號的2 號產品假
陰性率分別為0 和5%,?2 個不同批號的6 號產品假陰
性率分別為10%和5%,? 有假陰性樣品檢出,? 說明上
述2 種產品的靈敏度未達到0.5? μg/kg 要求,? 產品的
檢出限與商標標識并不相符。?
在其他8 種商標標識的最低檢出限>0.5?μg/kg 的
快檢產品中,? 當魚糜樣品中孔雀石綠殘留量為1.5?
μg/kg 時,? 有1 個批號的10 號產品假陰性率高達40%,?
且其檢測空白樣品的假陽性率達40%,? 說明該產品
的靈敏度未達到1.5? μg/kg 要求,? 且不能有效地分辨
空白和陽性樣品,? 產品的檢測能力與商標標識不相
符;? 當魚糜樣品中孔雀石綠殘留量為2.0? μg/kg 時,?2
個批號的1、3 和4 號產品均未檢出假陰性樣品,? 同
時也未檢出假陽性產品,? 說明上述3 種產品的靈敏度
與商品標識相符,? 且批間穩(wěn)定性好;? 產品5、7、8 和
9 均檢出假陰性樣品,? 其中9 號產品的假陰性率雖較
低,? 為5%,? 但其1 個批次產品的假陽性率高達75%,?
說明該產品分辨空白和陽性樣品的能力不足,? 如在
實際監(jiān)管中應用該產品進行檢測,? 將可能檢出大量
的假陽性樣品,? 增加監(jiān)管部門使用儀器驗證檢測結
果的負擔,? 影響監(jiān)管效率。?
以上結果說明,? 本次驗證的10 種孔雀石綠快檢
產品中,? 有7 種產品的檢測性能與其自身商標標識不
符,? 產品不達標。錢蓓蕾等[28]曾對3 種孔雀石綠快速
檢測試劑盒進行比較研究,? 結果顯示有2 種產品的檢
測限沒有達到產品標識要求。盧明艷等[29]對“瘦肉精”
快速檢測卡的質量實驗驗證結果顯示,? 用于檢測鹽
酸克倫特羅、萊克多巴胺和沙丁胺醇殘留的試紙條產
品質量參差不齊,? 差別極大,? 并提出應至少對產品的
假陰性率和最低檢出限進行驗證。伏慧明等[30]發(fā)現
應用快速檢測試劑盒類產品得出的檢測結果往往與
試劑盒所標示的各項技術指標相差甚遠,? 出現假陽
性的幾率很大,? 嚴重影響檢測方法的運用和結果的
判定,? 并提出在利用試劑盒進行藥物殘留檢測前,? 非
常有必要對試劑盒所標示的各項技術指標進行逐一
地驗證,從而對試劑盒做出評判。本研究結果同樣說
明,? 在將免疫膠體金類快速檢測產品應用于水產品
中孔雀石綠殘留檢測的質量安全監(jiān)管前,? 有必要對
產品的假陽性率、假陰性率、產品穩(wěn)定性等指標參數
進行篩選驗證。?
5? ? 結? ? 論?
本次驗證的10 種市售國產孔雀石綠免疫膠體金
類快檢產品中,? 有3 種產品能100%準確檢測出84 個
魚糜樣品中是否殘留孔雀石綠,? 且兩個不同批次產
品的檢測結果一致,? 穩(wěn)定性較好;? 另外7 種產品均檢
出假陽性或假陰性樣品,? 且2 個不同批號間產品的穩(wěn)
定性有差異,? 因此,? 在應用此類產品作為質量安全監(jiān)
管工具前,? 有必要對其最低檢出限、假陽性率、假陰
性率、穩(wěn)定性等參數進行驗證。10 種快檢產品檢測
水產品中孔雀石綠殘留的用時均遠低于傳統(tǒng)儀器法
第5 期? 劉? ? 歡,? 等:? 免疫膠體金快速檢測水產品中孔雀石綠殘留的質量分析和評價?1681 ?
?????
?
的用時,? 且只需一定的簡易輔助儀器設備,? 適合在具
有簡單實驗條件的場所中使用。?
參考文獻?
[1] 翟毓秀,? 郭瑩瑩,? 耿霞,? 等.? 孔雀石綠的代謝機理及生物毒性
研究進展[J].? 中國海洋大學學報,?2007,?37(1):?27-32.?
Zhai?YX,? Guo?YY ,?Geng?X,? et al.?Advances?in?studies?on ?
metabolic? mechanism?and?bio- toxicity?of? malachite? green?[J] .?
Period?Ocean?Univ?China,?2007,?(37)1:?27-32.?
[2] Meyer?FP ,?Jor gensen?T A.? Teratological?and?other?ef fects?of ?
malachite?green?on?the?development?of?rainbow?trout?and?rabbits?
[J].?Trans?Am?Fish?Soc,?1983,?112(6):?818-824?
[3] Fernandes?C, ?La litha?VS, ?Rao ? VK.?Enhancing? effects?of?
malachite?green?on?develop ment?of?hepatic?pr eneoplastic?lesions?
induced?by ?N- nitrosodiethylamine? in?r ats?[J] .?Car cinogensis,?
1991,?12:?839-845?
[4] Rao?KVK.?Inhibition?of?DNA?synthesis?in?primary?rat?hepatocyte?
cultures?by? malachite?green:?a?ne w?liver?tu mor?pro moter?[J].?
Toxicol?Let,?1995,?81(2-3):?107-113?
[5] 馬兵,? 穆迎春,? 宋懌,? 等.? 各國藥物殘留限量標準比對分析及
對中國水產品出口貿易的影響[J].? 中國農學通報,?2010,?
26(17):?398-402.?
Ma?B,?Mu?YC,?Song?Y,?et al.?Comparrative?analysis?of?medicine?
maximum?r esidue?l imit?s tandard? on?its?r ealation?with?aquatic?
products?tr ade?in ? china?[J] .?Chin? Agric?Sci?Bull,?2010, ?26( 17):?
398-402.?
[6] 中華人民共和國農業(yè)部．農業(yè)部關于印發(fā)《2014 年農產品質
量安全專項整治方案》的通知[EB/OL].?[201 4-03-03].?
http://www.moa.gov.cn/govpublic/ncpzlaq/201403/t20140311_38
09812.htm?
MOA.?Issued?by?t he?ministry?of ?agriculture?on?the?quality? and?
safety?of ?ag ricultural?p roducts? in?2014 ?rectification ?plan?[ EB/OL]?
[2014-03-03].?http ://www.moa.gov.cn/govpublic/ncpzlaq/201403/?
t20140311_3809812.htm?
[7] 中華人民共和國農業(yè)部．農業(yè)部關于印發(fā)《2013 年農產品質
量安全專項整治方案》的通知[EB/OL].?[201 3-03-25].?
http://finance.people.com.cn/n/2013/0325/c1004-20905956.htm?
MOA.?Issued?by?t he?ministry?of ?agriculture?on?the?quality? and?
safety?of?agricultural?products?in?2013?rectification?plan?[EB/OL].?
[2013-03-25].?htt p://finance.people.com.cn/n/2013/0325/c1004-?
20905956.htm?
[8] 中華人民共和國農業(yè)部.? 農業(yè)部公布2012 第一次產地水產品
質量安全監(jiān)督抽查結果[EB/OL].?[20 12-11-09].?
http://www.cnfm.gov.cn/yyywyzj/201211/t20121109_3057027.htm?
MOA.?T he?departm ent?of?agr iculture?announced?2 012?or igin?
aquatic?products?quality?safety?s upervision?and?sp ot?check?result ?
for?the?fi rst?tim e?[E B/OL].?[2012- 11-09].?
http://www.cnfm.gov.cn/?
yyywyzj/201211/t20121109_3057027.htm?
[9] 劉歡,? 邢麗紅,? 宋懌,? 等.? 水產品中硝基呋喃類代謝物殘留快
速檢測產品的質量分析和評價[J].? 中國漁業(yè)質量與標準,?2013,?
3(2):?74-79.?
Liu?H,?Xing? LH,?Song?Y ,? et al.?Evaluation?of?r apid?detection ?
products?of?nitrofuran? metabolites? residue?in?seafood ?[J].?Chin ?
Fish?Qual?Stand,?2013,?3(2):?74-79.?
[10] Wang?S, ? Zhang?C, ?Z hang?Y.?L ateral?flow?colloidal?g old-based?
immunoassay?for ?pesticide?[M ]//?A vraham?R ,?Keith?E ? H.?
Methods?in? Molecular?Biology :? Biosensors?and?Biodetection, ?
2009,?504:?237-252.?
[11] Paek?SH,?Le e?SH,?Cho?JH,? et al.?Development?of?rapid?one-step?
immune?chr omatographic?assay ?[ J].? Methods,?2000, ?22( 1):?
53-60.?
[12] May?K.?Home?tests?to?monitor?fertility?[J].?Am?J?Obstet?Gynecol,?
1991,?165(6):?2000-2002.?
[13] 王蔚芳,? 李青梅,? 郭軍慶,? 等.? 膠體金免疫層析快速檢測技術
及其在水產養(yǎng)殖業(yè)中的應用前景[J].? 漁業(yè)科學進展,?2010, ?
30(3):?113-118.?
Wang?WF ,?Li? QM,?Gu o? JQ,? et al.?Pr ogress? and?pr ospect?of?
colloidal?gold-based?immune?chromatographic?lateral?flow?assay?
and?its?application?in?aquacultur e?[J].?Prog?Fish?Sci,?2010,?30(3):?
113-118?
[14] 祁光宇,? 智曉瑩,? 任維維,? 等.? 膠體金免疫層析技術在動物源
性食品中的應用[J].? 東北農業(yè)大學學報,?2010,?41(4):?156-160.?
Qi?GY,?Zhi?XY,?Ren?WW,?et al.?Application?progress?of?colloidal?
gold?immune?chr omatographic?assay?( GICA)?in ?anim al-derived?
food?[J].J?Northeast?Agric?Univ,?2010,?41(4):?156-160.?
[15] 徐銳.? 海產品中恩諾沙星殘留的免疫膠體金層析現場快速檢
測技術[D].? 青島:? 中國海洋大學,?2013.?
Xu?R. ?E nrofloxacin?r esidues?in?seafood?im munogold?
chromatography-site?r apid?tes ting?technology ? [D].?Qingdao: ?
China?Ocean?University,?2013.?
[16] 張敏,? 李翹,? 盛慧萍.? 磺胺類藥物膠體金快速檢測試劑條的研
制及在水產品中的應用[J].? 中國農學通報,?2013,?29(8):?75-79.?
Zhang?M ,?L i? Q,? Sheng?HP .?Develop ment?and?application?of ?
colloidal?gold?r apid?test?str ip?fo r?sulfonam ides?in?aquatic?
products?[J].?Chin?Agric?Sci?Bull,?2013,?29(8):?75-79.?
[17] 周思,? 肖小華,? 李攻科．食品安全快速檢測方法的研究進展[J].?
色譜,?2011,?29(7):?580-586．?
Zhou?S, ?Xiao?XH, ? Li?GK.?Deve lopment?of?r apid?detection?
techniques?for?food?safety ?[J] .?Chin?J?Chr omatogr,?2011,?29( 7):?
580-586.?
[18] Crooks?S teven?R H,?M cCarney?B,?T raynor?IM .? Detection?o f?
levamisole?r esidues?in?bovine ?liver ?and?m ilk?by?
immunobiosensor?[J].?Anal?Chim?Acta,?2003,?483:?181-186.?
1682? 食品安全質量檢測學報? 第6 卷?
?????
?
[19] Girotti?S,?Bolelli? L,?Roda?A,? et al.?Improved?detection?of?t oxic?
chemicals?using?biolu minescent?bac teria?[ J].?Anal ?Chi m?Act a,?
2002,?471(1):?113.? ?
[20] 周煥英,? 高志賢,? 孫思明,? 等.? 食品安全現場快速檢測技術研
究進展及應用[J].? 分析測試學報,?2008,?27(4):?788-794.?
Zhou?HY,?Gao?ZX,?Sun?SM,?et al. Development?and? application?
of?on-site?fast?detection?technique s?for?food?safety ?[J].?J?Instrum?
Anal,?2008,?27(4):?788-794.?
[21] 張曉輝,? 李余動,? 孔蕾,? 等.?EL ISA 和GICA 快速檢測水產品
中氯霉素殘留的比較[J].? 浙江農業(yè)學報,?2005,?17(4):?216-218.?
Zhang?XH,?Li?YD,?Kong?L,?et al.?Comparison?of?rapid?detection?
of?chlor amphenicol?r esidues?in?aqu atic?pr oducts?on? by?E LSIA?
and?GICA?[J].?Acta?Agric?Zhejiang,?2005,?17(4):?216-218.?
[22] 蔡姍姍.? 商品化食品安全檢測試劑盒評價制度研究[D].? 福州:?
福建農林大學,?2013.?
Cai?SS.?Studies?on?evaluation?sy stem?of?commercial?food?safety ?
testing?kit?[D] .?Fuzhou:?Fujian ?Agr iculture?an d?For estry?
University,?2013.?
[23] 劉歡,? 孫偉紅,? 馬兵,? 等.? 水產品中氯霉素殘留快速檢測產品
的質量分析和評價[J].? 中國漁業(yè)質量與標準,?2012, ? 2(3):?
55-61.?
Liu?H, ? Sun? WH,?Ma?B ,? et al.? Evaluation?of?r apid? detection?
products?of?chlor amphenicol? residue?in?seafood?[J] .?Chin?Fish?
Qual?Stand,?2012,?2(3):?55-61.?
[24] GB/T?19857- 2005? 水產品中孔雀石綠和結晶紫殘留量的測定
[S].?
GB/T?19857- 2005?T he?determ ination?of?m alachite?green?and ?
crystal?violet?residues?in?aquatic?products?[S].?
[25] 朱小紅.? 現場快速檢測在食品監(jiān)督中的應用及展望[J].? 食品
工業(yè)科技,?2010,?31(8):?303-307.?
Zhu?XH.?Application?of?on-site?fast?detection?for?food?safety?[J].?
Sci?Technol?Food?Ind,?2008,?27(4):?788-794.?
[26] 劉歡,? 李晉成,? 吳立冬,? 等.? 現場快速檢測在水產品藥物殘留
監(jiān)管中的應用及發(fā)展建議[J].? 食品安全質量檢測學報,?2014, ?
5(8):?2302-2307.?
Liu?H,?Li?JC,? Wu?LD,? et al.?Application? and? development?
proposals?of?on- site?fast?detec tion?for?supervision?drug?residues?
in?aquatic?products?[J].?J?Food?Saf?Qual,?2014,?5(8):?2302-2307.?
[27] GB/T?20361- 2006? 水產品中孔雀石綠和結晶紫殘留量的測定?
高效液相色譜熒光檢測法[S].?
GB/T?20361- 2006?T he?determ ination?of?m alachite?green?and ?
crystal?violet?r esidues?in?a quatic?pr oducts?HPL C?fluor escence?
assay?[S].?
[28] 錢蓓蕾,? 王媛,? 蔡友瓊.? 孔雀石綠快速檢測試劑盒的比較研究
以及在水產品監(jiān)控中的應用[J].? 現代漁業(yè)信息,?201 1,?26( 10):?
19-21.?
Qian?BL ,?Wang?Y,?Cai?YQ. ?Comparative?study ?on?thr ee?quick ?
testing?boxes?fo r? malachite?gr een?and?its?application?on ?
monitoring?aquatic?products?[J].?Mod?Fish?Inform,?2011,?26(10):?
19-21.?
[29] 盧明艷,? 何雷堂,? 馬瑞林,? 等.?“瘦肉精”檢測卡(試紙條)質量
驗證試驗[J].? 飼料工業(yè),?2011,?32(21):?46-48.?
Lu?MY,? He?LT,? Ma?RL , et al.? "Clenbuterol"?test?car d?( strip)?
quality?validation?test?[J].?Feed?Indust,?2011,?32(21):?46-48.?
[30] 伏慧明,? 郭展旗,? 王翠英,? 等.? 獸藥殘留檢測中試劑盒的驗證
評判方法研究[J].? 中國農業(yè)科技導報,?2008,?10(S2):?109-111.?
Fu?HM,?Guo?ZQ,? Wang?CY, et al.? Evaluation?of?Kit? Detecting?
Veterinary? Drug?Residues?[J] .?J?Agr ic?Sci?T ech?2008, ?10( S2):?
109-111.?
(責任編輯:?李振飛)?
?
作者簡介? ?
劉? ? 歡,? 副研究員,? 主要從事水產品
質量安全監(jiān)管及檢測技術研究。?
E-mail:?liuh@cafs.ac.cn?
?

網友評論 more

食品安全論文最新內容

07-16