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高效液相色譜法同時(shí)測定食品中納他霉素和富馬酸二甲酯的含量

文檔作者：官詠儀1，邱志超擴(kuò)，金夢1，宋陽1，張美金1，陳毓芳1，謝玉珊1 文檔來源： (1．廣東出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心 2．廣州質(zhì)量監(jiān)督檢測研究院		點(diǎn) 擊數(shù)：	更新時(shí)間： 2025年06月28日
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第8卷第6期食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào)Vbl．8 No．6
2017年6月Joumal ofFood Safety and Quality Jun．，2017
高效液相色譜法同時(shí)測定食品中納他霉素和
富馬酸二甲酯的含量
官詠儀1，邱志超擴(kuò)，金夢1，宋陽1，張美金1，陳毓芳1，謝玉珊1
(1．廣東出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心，廣州510623；2．廣州質(zhì)量監(jiān)督檢測研究院，廣州511447)
摘要：目的建立高效液相色譜法同時(shí)測定食品中納他霉素、富馬酸二甲酯的分析方法。方法樣品用甲
醇溶解提取、超純水定容，Agilent Tc．c18柱色譜分離，采用高效液相色譜-光電二極管陣列檢測器進(jìn)行檢測，
并以峰面積外標(biāo)法定量。結(jié)果在4種基質(zhì)、4個添加水平下，納他霉素的平均回收率在88．1％～97．7％之間，相
對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2．47％～5．72％，檢出限為0．10 mg／kg；富馬酸二甲酯的平均回收率在84．5％～104％之間，相對標(biāo)
準(zhǔn)偏差為1．21％～5．28％，檢出限為0．05 mg／蠔。結(jié)論該方法具有操作簡便、快速、準(zhǔn)確的特點(diǎn)，適用于食品
中納他霉素、富馬酸二甲酯的含量分析。
關(guān)鍵詞：高效液相色譜法；納他霉素；富馬酸二甲酯
Simultaneous determination of natamycin and dimethyl fumarate in foods by
high perfbrmance liquid chromatography
GUAN Yong—Yil，QIU Zhi—Chao擴(kuò)，JIN Men91，SoNG Yan91，ZHANG Mei—Jinl，
CHEN Y-u—Fan91，XIE Yru—Shanl
(1．^％￡p已cffo玎口咒d Q“口，‘以珂ffn已Z吝c^nD正9呈∥CP胛據(jù)r，G“Ⅱ玎。寶臼。玎g．￡抽f，)，一．￡強(qiáng)豇砌置PecfiD胛口玎d Q“口，。口玎fi胛P曰“，它口甜，
Gzf口以罟z五D“5 1 0623，(瑰in以；2．G“以胛gz矗o“Q“a，f鈔-S缸pe，V括fo玎and 7匆sffng砌sf打“fe，G“口聆gz矗D“5 1 1447，(璃i玎n)
ABSTRACT：objective Tb establish a method for simultaneous detemination ofnatamycin and dimethyl fumarate
(DMF)in foods by high perfomance liquid chromatography(HPLC)．Methods S啪ples were extracted by
methanol and water，separated by Agilent TC—C18 column，detected by HPLC with photo—diode array detector(PDA)
and quantified by the extemal standard method．Results At 4 dif佗rent spiked 1evels in 4 kinds of food，the aVerage
recoveries of natamycin were between 88．1％～97．7％，with the RSD of 2．47％～5．72％．The aVemge recoVeries of
dimethyl fIlmarate were between 84．5％～104％，with the RSD of 1．21％～5．28％．Detection 1imits of nat砌ycin and
DMF were 0．1 0 mg／埏and O．05 m∥蠔，respectively．conclusion This method is simple，fast and accurate，which
can be applied to the analysis of the contem of natamycin and DMF in foods．
KEY WoItDS：hi曲perfbmance liquid cllromatogr叩hy；natamycin；dimethyl如m缸ate
1 引言
納他霉素(natamycin)，也稱游鏈霉素、匹馬菌素或海
松素，是一種重要的多烯類抗菌素，能夠有效抑制酵母菌
等真菌的生長，且其難溶于水和油脂，難以被人體消化、
吸收，大部分?jǐn)z入的納他霉素會隨糞便排出，對人體造成
t通訊作者：邱志超，碩士，質(zhì)量工程師，主要研究方向?yàn)槭称焚|(zhì)量與安全檢測。E-mail：392479231@qq．com
+correspoⅡding author：QIu zhi—chao，Master，QuaI塒Engineer，Guangzhou Quality supeⅣision and Testing Institute，No．1—2，zhujiang Road，
Chao Tian In“strial zone，Shilou Town，Pan”District，Guangzhou 511447，China．E—mail：39247923l@qq．com
萬方數(shù)據(jù)
第6期官詠儀，等：高效液相色譜法同時(shí)測定食品中納他霉素和富馬酸二甲酯的含量2247
的毒性傷害極低，因而被批準(zhǔn)用于食品的防腐¨21。GB
2760一2014《食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》中對納他霉素在食品中
的最大使用量及表面使用殘留量作出了規(guī)定，其中表面使
用殘留量不得大于10 mg／1(擴(kuò)1。富馬酸二甲酯(dimethyl
fumarate，DMF)化學(xué)名為反丁烯二酸二甲酯，別名延胡索
酸二甲酯，能夠有效抑制多種霉菌、酵母菌和細(xì)菌的生長，
進(jìn)入人體后能分解成人體新陳代謝的正常成分“富馬酸”，
曾經(jīng)被認(rèn)為是一種低毒、高效、有前途的防腐劑而被廣泛
應(yīng)用于食品中【4，5】。但近年來，歐盟通報(bào)了多起消費(fèi)者因接
觸富馬酸二甲酯而受傷的案例，有研究表明富馬酸二甲酯
易水解成甲醇，會對人體腸道、內(nèi)臟造成腐蝕性損害，如
長期食用對肝、腎有較大的副作用【5]。2009年2月，全國
打擊違法添加非食用物質(zhì)和濫用食品添加劑專項(xiàng)整治領(lǐng)導(dǎo)
小組發(fā)布的《食品中可能違法添加的非食用物質(zhì)名單(第二
批)》(食品整治辦(2009]5號)【6]文件中，明確規(guī)定了富馬
酸二甲酯屬于食品中可能違法添加的非食用物質(zhì)。
目前，測定納他霉素的常見方法有高效液相色譜法
[7】、液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用法[8]、生物檢測法【9】和加壓毛細(xì)管
電色譜[1 o】等。富馬酸二甲酯常見的測定方法有高效液相色
譜法[111、液相色譜．質(zhì)譜聯(lián)用法‘51、氣相色譜法[12】、氣相色
譜．質(zhì)譜聯(lián)用法[1 3]和薄層法[】4]等。最常用的為液相色譜法
[1 5’1”，但流動相中多含緩沖鹽或偏酸，不利于色譜柱的長
久使用維護(hù)，針對多類食品同時(shí)開展納他霉素和富馬酸二
甲酯含量檢測的文章報(bào)道也鮮少見到。本研究采用高效液
相色譜法同時(shí)測定食品中的納他霉素和富馬酸二甲酯，具
有高效、快速、準(zhǔn)確、廣泛、高通量的優(yōu)點(diǎn)，為愈發(fā)繁重
的食品安全檢測工作提供了便利。
2材料與方法
2．1儀器與試劑
waters alliance e2695高效液相色譜儀(配備光電二極
管陣列檢測器，美國waters公司)；BT 124s電子天平(德
國sanorius公司)；sw 30H超聲波清洗機(jī)(瑞士s0N0
swIss公司)；Multi ReaX渦旋振蕩器(德國Heid01ph公司)；
4K15高速離心機(jī)(德國Sigma公司)；微孔有機(jī)相濾膜(孔徑
為0．22¨m)。
甲醇(色譜純，美國Thenno Fisher scientific公司)；超
純水(由Mill．Q純水器系統(tǒng)制得)；納他霉素(純度91．1％，
美國藥典)；富馬酸二甲酯(純度99．5％，德國
Dr．Ehrenstorfer公司1。
牛奶、糕點(diǎn)、熟肉、飲料購于當(dāng)?shù)爻小?
2．2實(shí)驗(yàn)方法
2．2．1標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制
分別稱取約25 mg納他霉素、富馬酸二甲酯標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，
用甲醇：水(1：1，曠功溶解定容至25 mL，配制成1000 m∥L
的標(biāo)準(zhǔn)儲備液，于一20℃下保存。臨用前分別移取適量納他
霉素、富馬酸二甲酯的標(biāo)準(zhǔn)貯備液至同一容量瓶中，用甲
醇：水(1：l，壚功定容稀釋配制成100 mg／L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，
然后用甲醇：水(1：1，礦功逐級稀釋得到質(zhì)量濃度為0．05、
0．10、0．20、O．50、1．00、2．00、5．00、10．00、20．00 m∥L
的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。
2．2．2樣品前處理
稱取5．00 g樣品于50 mL具塞塑料離心管中，加入30
mL甲醇，超聲10 min、渦旋15 min溶解提取。用超純水
定容至50 mL，混勻后放人冰箱冷凍30 min左右，10000
r／min高速低溫離心5 min，經(jīng)0．22 um有機(jī)相濾膜過濾后，
供液相色譜上機(jī)分析。
2．2_3 色譜條件
色譜柱：A皇ilent Tc·c18色譜柱(250 mm×4．6 mmj 5
肚m)；流動相為甲醇：水(65：35，礦"；流速為0．8 mL／min；
柱溫為25℃；進(jìn)樣量為20此；波長為218砌。
2．3數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)方法
采用Empower3軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，輸出線性回歸方
程和含量結(jié)果。4種基質(zhì)分別進(jìn)行空白實(shí)驗(yàn)和4個添加濃
度水平的加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)，其中空白實(shí)驗(yàn)采用2個平行重
復(fù)實(shí)驗(yàn)后取平均值。加標(biāo)實(shí)驗(yàn)每個添加濃度進(jìn)行6平行，
各自扣除空白后計(jì)算回收率實(shí)驗(yàn)，最終得出平均回收率和
相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。
3結(jié)果與分析
3．1分析條件的優(yōu)化
3．1．1流動相的選擇
參考各類標(biāo)準(zhǔn)方法和文獻(xiàn)，一般以乙酸鈉一甲醇、乙酸
銨．甲醇、甲醇一水一乙酸為流動相，這些流動相一般存在緩
沖鹽比例較高、pH值偏酸的特點(diǎn)，不利于色譜柱的長久使
用與維護(hù)。本研究選用常用的甲醇：水(65：35，"功作為流動
相。如圖1所示，在此流動相下，納他霉素和富馬酸二甲
酯標(biāo)準(zhǔn)品峰形對稱、分離度高。圖2為4種不同基質(zhì)的樣
品加標(biāo)色譜圖，基質(zhì)本底皆不含納他霉素和富馬酸二甲酯，
加標(biāo)濃度為50 mg／L，其中牛奶、糕點(diǎn)、飲料樣品色譜圖，
目標(biāo)峰周圍無干擾峰，分離度高；熟肉樣品因樣品基質(zhì)復(fù)
雜，富馬酸二甲酯左側(cè)有一小干擾峰，因而回收率比其他
3種基質(zhì)略低，但仍達(dá)到80％，滿足檢測要求。
3．1．2檢測波長的選擇
取20皿質(zhì)量濃度為20 mg／L的納他霉素和富馬酸二
甲酯混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，在波長200～310 nm范圍內(nèi)掃描。結(jié)果
顯示(見圖3)，富馬酸二甲酯和納他霉素的最大吸收分別
出現(xiàn)在210 nm和303 nm處，當(dāng)納他霉素出現(xiàn)最大吸收時(shí)
富馬酸二甲酯已趨向于無吸收。在215～225 nm范圍內(nèi)，富
馬酸二甲酯一直保持高響應(yīng)，納他霉素的響應(yīng)值也能保證
在105以上且變化不大。同時(shí)，為了避免在分析檢測過程
萬方數(shù)據(jù)
2248 食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào)第8卷
中儀器可能出現(xiàn)的波動導(dǎo)致保留時(shí)間變化，所以設(shè)置方法
時(shí)不考慮波長變化時(shí)間的設(shè)定，最終選取218 11IIl作為本
研究的分析波長。
3．1．3提取溶液的選擇
駱健美等[¨1研究納他霉素在不同溶劑中的溶解度，
發(fā)現(xiàn)納他霉素在甲醇中的溶解度最好。富馬酸二甲酯在食
品中的檢測農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中用氨水：甲醇(1：20，矽功提取后再用
鹽酸調(diào)節(jié)pH值[11】，但劉義等[161在實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)富馬酸
二甲酯在堿性條件下會發(fā)生分解，之后通過酸調(diào)節(jié)pH值
也不可逆，且富馬酸二甲酯在甲醇中易溶，因此選用甲醇
作為提取溶液。因?yàn)榱鲃酉酁榧状迹核?65：35，曠功，所以經(jīng)
甲醇提取后用超純水進(jìn)行定容，使上機(jī)溶劑濃度比例接近
流動相。引6
3．2方法學(xué)驗(yàn)證o．10
3．2．1 標(biāo)準(zhǔn)曲線及檢出限
在O．1～20．0 mg／L質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，線性良好，得到
納他霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為p3．77×10％1．35×103，富
馬酸二甲酯標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為y_1．27×10’尉7，74×102，
線性相關(guān)系數(shù)，均大于0．999。分別以糕點(diǎn)、牛奶、熟肉、
飲料為基質(zhì)，逐級稀釋混合標(biāo)準(zhǔn)溶液上機(jī)分析，通過3倍
信噪比，得出納他霉素和富馬酸二甲酯的檢出限分別為
焉|——業(yè)—上o‘00匕==二二二=：==蕉2====]圭三【=
l：富馬酸二甲酯(dimethyl fumarate)；2：納他霉素(natarnycin)
圖1富馬酸二甲酯、納他霉素標(biāo)準(zhǔn)(20 mg／L)色譜圖
Fig．1 Chromatogram of dimethyl fumamte and natamycin standard
(20 mg／L)
1：富馬酸二甲酯(dimethyl fumarate)；2：納他霉素(natamycin)
圖2 富馬酸二甲酯、納他霉素樣品加標(biāo)(50 m∥L)色譜圖
Fig．2 chmmatograms of dimethyl mrnamte and natamycin spiked samples(50 m∥L)
萬方數(shù)據(jù)
第6期官詠儀，等：高效液相色譜法同時(shí)測定食品中納他霉素和富馬酸二甲酯的含量2249
3．5×106
2．5×106
2．O×106
l 5×106
1．O×106
5．O×105
200 205 2lO 215 220 225 230 235 240 245 250 255 260 265 270 275 280 285 290 295 300 305 3l
圖3不同檢測波長的響應(yīng)值
Fig．3 Response signal values of difkrent detected waVelengms
表1 4種基質(zhì)中納他霉素和富馬酸二甲酯的加標(biāo)回收率和相對
標(biāo)準(zhǔn)偏差0=6)
Thble 1 Results of recoveries and relative standard deviations of
natamycin and dimethyI fumarate in 4 I【inds of food(櫛=6)
4結(jié)論
本研究選用4種具有代表性的食品基質(zhì)，分別添加不
同濃度水平的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，經(jīng)甲醇超聲提取、超純水定容后，
一波長(nm)
O
在優(yōu)化的高效液相色譜條件下進(jìn)行上機(jī)分析，納他霉素和
富馬酸二甲酯皆有良好的線性、回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。
本方法具有靈敏度高、穩(wěn)定性好、快速簡便的優(yōu)點(diǎn)，能夠
廣泛應(yīng)用于各類食品中高通量同時(shí)檢測納他霉素和富馬酸
二甲酯。
參考文獻(xiàn)
?岳吳博，岳喜慶，李靖，等．納他霉素(natamycin)的特性、應(yīng)用及生產(chǎn)
和研究狀況[J】食品科技，2007，3(45)：162—166．
Yue HB，Yue XQ，Li J，甜口，．The ch鋤cteristics，application，production
and research stams of natamycin[J]．Food sci 1bclmol，2007，3(45)：
162—166．
[2】閻永貞，周緒霞，李衛(wèi)芬，等．納他霉素抑菌機(jī)理及其在食品中的應(yīng)用
[J]．食品工業(yè)科技，2叭0，4(79)：365—367，373．
Yan YZ，Zhou XX，Li WF，鰣nf．Antimicrobial mech姐ism and the
application 0f natamycin in food[J]sci Tecllllol Food Ind，2010，4(79)：
365—367．373．
[3]GB 2760．2014食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)[s]．
GB 2760．2014 National food safbty staIldard for uses of food additives
[S]
f4]韓云海，唐政，韓萍．新型食品防腐劑富馬酸二甲酯的合成[J]化學(xué)
工程與設(shè)備，2008，(7)：27—28
Han YH，Tang Z，Han P Syllthesis of new food preseⅣatiVe named
dimethyl fumarate【J]chem Eng Equip，2008，(7)：27—28．
[5]唐麗娜，寧煥炎，曾憲遠(yuǎn)，等．超高效液相色譜一串聯(lián)質(zhì)譜法測定糕點(diǎn)
中富馬酸二甲酯[J】安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42(21)：7178-7179，7200
Tang LN，Ning HY，zeng xY，鮒口f DeterIIlination of dimethyl m眥rate in
cake by ultra hi曲perf0姍a11ce liquid chromatogr印hy-tandem mass[J]J
A11hui Agric sci，2014，42(21)：7178—7179，7200．
[6]食品中可能違法添加的非食用物質(zhì)名單(第二批)[z]
List ofillegal addnives maybe add in foods(second batch)[z]．
[7】張慧，吳穎，朱蕾，等超高效液相色譜法檢測飲料中納他霉素的含量
[J]食品工業(yè)科技，2012，(08)：86—87，91．
Zhang H，Wu Y Zhu L，“df．Detemination of natamycin in Vanous
萬方數(shù)據(jù)
2250 食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào)第8卷
driTlks by ultra perf0加ance liquid chmmatography[J]sci Techn01
F00d Ind，2012，(08)：86—87，91．
[8]李嬡媛，王偉，關(guān)樹文，等高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定酸奶中納
他霉素的含量[J]中國衛(wèi)生檢驗(yàn)志，2010，20(4)：76l一762．
“YY’Wallg w，Guan S W，“n，DeteⅡnination of natanlycin in yogb叭
using liquid chromatography-mass spec仃ome‘ry[J]．chin J Health Lab
Technol，2010，20(4)：761—762
[9]喬春明，劉坤，葛菁萍，等發(fā)酵液中納他霉素的生物檢測法[J】食品
科學(xué)，2009，(7)：159—161．
Qiao cM，Liu K，Ge QP，甜口， Bioassay method of natamycin in
fementanon broth【J]Food sci，2009，(7)：159一161．
[10】郭啟雷，趙麗，史海良，等．加壓毛細(xì)管電色譜測定食品中納他霉素的
檢測方法研究[J]食品工業(yè)，2014，(12)：276_279．
Guo QL，zhao L，shi HL，甜口f．Determination of natamycin in foods by
press謝zed c印i11ary electro—chromatography[J]F00d Illd，2014，(12)：
276—279．
[1 1]NY／T 1723-2009食品中富馬酸二甲酯的測定高效液相色譜法[s]
NY廠r 1723-2009 Detem=lination of dimetIlyl血marate in food—Hi曲
perfomallce liquid c11romatography method[S]．
[12]徐麗紅，王建清，丁蓓茹，等Gc法檢測三類食品中富馬酸二甲酯的
含量[J]浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2011，(4)：807—811．
xu LH，waIlg JQ，Ding BR，“口?Detemination of dimethyl fumarate in
t11rce呻es of foodby gas chromatography【J]Acta A鰣c zhejiangensis，
2011，(4)：807—811
[13]梅雯芳，唐明，王佳杰，等．氣質(zhì)聯(lián)用測定糕點(diǎn)中富馬酸二甲酯[J]食
品工業(yè)，2012，(09)：151—153
Mei wF，Tang M，Wang JJ，“Ⅱ，smdy on dirnethyl mmarate ofthe pas仃y
by GC／Gc-MS chromatogr印hy[J]．Food Ind，2叭2，(09)：151—153．
[14]張楊，陳偉強(qiáng)．薄層法檢測富馬酸二甲酯方法探討[J]中國衛(wèi)生檢驗(yàn)
雜志，2001，(6)：722
zhang Y chen wQ study on detecteing of dimethyl n瑚arate by tl】m
layer chmmatography[J]Chin Health Lab Tcchnol，2001，(6)：722
[15]駱健美，金志華，岑沛霖，等．納他霉素在不同溶劑中溶解度的測定與
關(guān)聯(lián)[J]高?；瘜W(xué)工程學(xué)報(bào)，2008，22(5)：733—738．
Luo JM，Jin ZH，Cen PL，“口Z MeasWement and correlation of the
solubilities of natamycin in difrerent solvents[J】．J chem Eng chill univ，
2008，22(5)：733138．
[16]劉義，朱顯琴，邱宏，等．高效液相色譜法同時(shí)測定食品中的糖精鈉、
苯甲酸、山梨酸、富馬酸二甲酯和脫氫乙酸鈉[J]中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，
2009，19(3)：582—583．
Liu Y，zhu xQ，Qiu H，甜以simultaneously detemination of saccha山
sodium， benzoic acid， sorbic acid， dimethyl mmarate and
dehydrogenation sodium acetate in foods by hi曲perfb肌ance iiquid
chromatography[J]chin J Health Lab T色chnol，2009，19(3)：582—583．
[17]GB／T 21915-2008食品中納他霉素的測定液相色譜法[s]
GB／T 21915-2008 Dete加ination of nat枷ycin in food—Liquid
chromatography[S]
(責(zé)任編輯：楊翠娜)
日
官詠儀，食品檢驗(yàn)工程師，主要研究
方向?yàn)槭称窢I養(yǎng)成分和添加劑檢測。
E—mail：stupid625@qq．com
邱志超，碩士，質(zhì)量工程師，主要研
究方向?yàn)槭称焚|(zhì)量與安全檢測。
E-ma訂：39247923 l@qq．com

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