導航：安全管理網>> 安全論文>> 食品安全論文>>正文

酶聯免疫吸附法在食品安全性指標檢測中的研究進展

文檔作者：馮敏1, 2 李亞楠1, 2 高麗霞1, 2, 黃登宇2, 3 文檔來源： 1. 山西大學生命科學學院 2. 山西大學食品藥品快速檢測中心 3. 山西省食品藥品監(jiān)督管理局,		點擊數：	更新時間： 2025年06月30日
下載地址：點擊這里	文件大?。?509.78 KB 共7頁	文檔格式： PDF	下載點數： 1 點（VIP免費）

全屏查看

內容預覽 [文件共7頁]

本文件共7頁，如需編輯使用，請下載。

注：預覽效果可能會出現部分文字亂碼（如口口口）、內容顯示不全等問題，下載是正常的。

	文件大?。?09.78 KB 共7頁文件格式：PDF 下載點數：1 點（VIP會員免費）

上一篇：納米基電分析生物傳感器在食品獸藥殘留檢…

文本預覽

僅提取頁面文字內容，供快速閱讀使用。

第7 卷 第10 期 食品安全質量檢測學報 Vol. 7 No. 10
2016 年10 月 Journal of Food Safety and Quality Oct. , 2016
*通訊作者: 黃登宇, 副教授, 主要研究方向為食品衛(wèi)生檢測。E-mail: Huangdy1110@126.com
*Corresponding author: HUANG Deng-Yu, Associate Professor, Shanxi University &amp;amp; Shanxi Food and Drug Administration, No.85, Longcheng
Avenue, Xiaodian District, Taiyuan 030006, China. E-mail: Huangdy1110@126.com
酶聯免疫吸附法在食品安全性指標檢測中的
研究進展
馮 敏1, 2, 李亞楠1, 2, 高麗霞1, 2, 黃登宇2, 3*
(1. 山西大學生命科學學院, 太原 030006; 2. 山西大學食品藥品快速檢測中心, 太原 030006;
3. 山西省食品藥品監(jiān)督管理局, 太原 030006)
摘要: 隨著我國社會經濟的快速發(fā)展和人們生活水平的提高, 食品安全問題日益成為人們關注的焦點。酶聯
免疫吸附法是在免疫學和細胞工程學基礎上發(fā)展的一種微量檢測技術, 具有操作簡便、靈敏度高等優(yōu)點。本文
總結了酶聯免疫吸附法在農藥殘留、獸藥殘留、致病微生物、生物毒素、非法添加的非食用物質、重金屬、
過敏原和轉基因食品等檢測中的研究進展, 評價了該檢測方法的優(yōu)缺點, 并對其未來的發(fā)展方向進行了展望
和建議。
關鍵詞: 酶聯免疫吸附法; 抗原; 抗體; 食品安全
Research progress of enzyme-linked immunosorbent assay in food safety
indices detection
FENG Min1, 2, LI Ya-Nan1, 2, GAO Li-Xia1, 2, HUANG Deng-Yu2, 3*
(1. College ofLife Science, Shanxi University, Taiyuan 030006, China; 2. The Food and Drug Safety Rapid
InspectionCenter, Shanxi University, Taiyuan 030006, China; 3. Shanxi Food and Drug
Administration, Taiyuan 030006, China)
ABSTRACT: With the development of society and the improvement of people'sliving standards, food safety problem
has becomethe focus of the attention. Enzyme-linked immunosorbentassay(ELISA)is a trace detection technology
based on immunology and cell engineering, which is simple and sensitive. In the paper, the research progressofELISA
in analysis of food safetywere reviewed, including the detection of pesticide residues, veterinarydrugresidues,
pathogenic microbes, biological toxin, illegally added inedible substance, heavy metal pollution, allergen, genetically
modified food, etc. The advantages and disadvantagesof ELISA were evaluated, and its futureperspective was also
prospected and suggested.
KEY WORDS: enzyme linked immunosorbent assay;antigen; antibody; foodsafety
1 引 言
食品安全主要包括食品衛(wèi)生安全、食品供應質量安全
和食品供應總量安全[1]。針對食品安全問題, 檢測技術的
開發(fā)是當今迫切需要解決的技術壁壘[2]。目前常用的食品
安全質量檢測技術包括色譜、質譜技術、光譜分析法、生
物檢測技術等[3],這些方法檢測時間長、儀器昂貴、操作復
雜, 不能滿足快速檢測的要求[4,5]。20 世紀70 年代, Engval
萬方數據
3974 食品安全質量檢測學報 第7 卷
等[6]建立了酶聯免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent
assay, ELISA)定量測定lgG 的方法, 該方法具有干擾性小、
靈敏度高、操作快捷、污染小、安全性高等特點, 被廣泛
用于食品安全檢測。ELISA 分類標準不統(tǒng)一, 但可根據試
劑來源、標本性狀及檢測條件等將現有的檢測技術分為夾
心法、間接法、競爭法和捕獲法4 種方法[7]。
2 ELISA 在食品安全性指標檢測中的應用
2.1 農藥殘留檢測
每年我國都會發(fā)生因食用農藥殘留超標的蔬菜而引
起人畜中毒的事件, 另外在蔬菜的出口貿易中也存在因農
藥殘留超標而使貿易受阻的問題。農藥殘留對我國蔬菜產
品的質量和人民的飲食安全都有重要的影響[8]。農藥殘留
常用的快速檢測方法有酶抑制法和ELISA[9]。果蔬中的有
機磷和氨基甲酸酯類農藥的酶抑制率檢測方法比較成熟,
但需要注意的是, 樣品取樣的規(guī)范操作及取樣部位會影響
檢測的準確度, 酶試劑易失活導致反應不穩(wěn)定, 檢測結果
誤差較大, 重復性差[10]。ELISA 操作步驟簡便, 適用于樣
品量較大的分析篩選,但是ELISA 受限于抗體和抗原制備
和提取[11,12]。
Otieno 等[13]建立了檢測毒死蜱殘留的ELISA 方法,
該方法對于水和沉積物樣本的檢測限(limit of detection,
LOD)是0.37 μg/L 和0.42 μg/kg(干重), 平均回收率和變異
系數(coefficient of variation, CV) 分別為(96.0±5.8)% 和
(108.0±3.4)%, 與高效液相色譜法相比無顯著差異
(P>0.05) 。Alexandra 等[14] 建立了檢測滴滴涕
(dichlorodiphenyltrichloroethane, DDT)及其相關化合物的
ELISA 方法, 結果顯示LOD 是0.06 μg/L, 線性范圍為
0.1~2 μg/L, DDT 相關化合物的LOD 是0.04 μg/L, 線性范
圍為0.07~1 μg/L。曾俊源等[15]建立了測定桃中氰戊菊酯直
接競爭ELISA 法, 線性范圍為0.01~10 mg/L, 相對標準偏
差(RSD, n=5)為4.5%, IC50 為193 μg/L。在2、0.2 和0.05
mg/kg 添加水平下, 回收率分別為81%~89%、85%~98%和
85%~106%, RSD 分別為5.1%、5.6%和7.7%(n=5), LOD 是
0.014 mg/kg。
2.2 獸藥殘留檢測
獸藥殘留包括獸藥原藥、獸藥在動物體內的代謝物以
及與獸藥有關的雜質等物質[16]。獸藥殘留會引起中毒, 其
次長期的獸藥殘留會產生耐藥性的菌株, 從而提高了疾病
治療的難度, 還會導致過敏反應, 并影響生態(tài)環(huán)境, 最終
制約畜牧業(yè)的發(fā)展[17]。獸藥殘留常用的方法有微生物法、
儀器分析法[18]。微生物法適用于對畜禽組織中的抗菌藥物
進行篩選檢驗, 該方法雖然能檢測高濃度的殘留, 但是檢
測限高于樣品所規(guī)定的最高殘留限量[19]。建立對獸藥殘留
快速檢測的方法已較為緊迫, ELISA 已經成為廣泛應用的
快速檢測獸藥殘留的方法[20]。
硝基呋喃類獸藥是一類人工合成的廣譜抗菌藥, 主
要用于預防和治療由大腸桿菌和沙門氏菌引起的腸道感染,
主要包括呋喃妥因、呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃西林[21,22]。
李亞楠等[23]建立了檢測動物組織中的呋喃妥因代謝物的直
接競爭化學發(fā)光酶免疫法(chemiluminescent enzyme-linked
immunoassay, CLEIA), 線性檢測范圍為0.030~10.595
ng/mL, IC50 為0.559 ng/mL; 雞肉樣品中的LOD 為0.015
μg/kg; 加標回收率為84.9%~103.4%, 批內CV 為
3.4%~7.8%, 批間CV 為4.7%~11.8%; 除與呋喃妥因原藥
交叉反應率為36.2%, 與其他結構類似物及衍生化試劑交
叉反應率均小于0.1%。王瑞等[24]建立了檢測動物組織中的
呋喃妥因代謝物的間接競爭CLEIA法, IC50為0.753 ng/mL,
在雞肉組織中的LOD 為0.028 μg/kg, 添加回收率在
80.54%~102.64%之間, CV 均小于10%。李亞楠等[25]建立
了檢測動物組織中的呋喃妥因代謝物的直接ELISA 法,線
性方程為Y=-34.723X+158.01(r2=0.9922), 線性檢測范圍為
0.177~11.508 ng/mL, IC50 為1.291 ng/mL; 豬肉、雞肉、魚
肉的LOD 分別為0.115、0.113、0.109 μg/kg, 加標回收率
在82.6%~104.7%之間, 批內CV 在3.6%~9.3%之間, 批間
CV 在4.3%~12.4%。Liu 等[26]建立了檢測呋喃妥因代謝物
殘留的間接競CLEIA 法, 線性范圍0.03~64 μg/L, LOD 是
0.01 μg/L, 添加回收率為92.1%~107.7%。任海濤等[27]建立
了ELISA 法檢測呋喃西林代謝物, IC50 為12.37 ng/mL, 線
性范圍為0.439~110.78 ng/mL, LOD 為0.07 ng/mL。閆葉娜
[28]建立了檢測呋喃西林代謝物的間接競爭ELISA 法和
CLEIA 法。ELISA 最適檢測范圍為0.1~80 ng/mL, LOD 為
0.03 μg/L, 批內CV 和批間CV 分別為2.480%和3.385%,
IC50 為2.19 ng/mL; CLIA 的最適檢測范圍0.1~80
ng/mL,LOD 為0.02 μg/L, IC50 為1.85 ng/mL。李敏等[29]建
立了檢測呋喃唑酮代謝物的間接競爭ELISA 法, 線性范圍
為0.25~10 ng/mg, IC50 為0.5881~1.1333 ng/mL; 此外經檢
測與其他類似物的交叉反應率, 特異性良好。
直接競爭CLEIA 法的靈敏度和最低檢測限均優(yōu)于間
接競爭CLEIA 法, 與ELISA 法相比, CLEIA 法具有更高的
靈敏度和更低的檢測下限, 其靈敏度比ELISA 法高出一個
數量級左右。在操作過程中, CLEIA 法不需要長時間和較
高溫度的孵育顯色, 加入化學發(fā)光液后, 室溫避光反應4
min 即可檢測。因此, CLEIA 法在檢測時間、靈敏度及最低
檢測限方面表現出了較大的優(yōu)越性。其中, 直接競爭
CLEIA 法的靈敏度和最低檢測限又優(yōu)于間接競爭CLEIA
法, 因此在實際檢測和產品試劑盒的研發(fā)中, 優(yōu)先選擇直
接競爭CLEIA 法。
2.3 致病微生物檢測
目前不論是在發(fā)展中國家還是發(fā)達國家, 對食品安
全影響較大的是致病微生物引起的食源性疾病, 而在人們
萬方數據
第10 期 馮 敏, 等: 酶聯免疫吸附法在食品安全性指標檢測中的研究進展 3975
食物鏈中, 單增李斯特菌、空腸彎曲菌、沙門氏菌都是重
要的食源性致病菌[30]。伍燕華等[31]建立了檢測沙門氏菌的
雙抗夾心ELISA 法, 該法以抗沙門氏菌多克隆抗體作為捕
獲抗體, 以抗沙門氏菌單克隆抗體C1359 作為檢測抗體,
對A、B、C、D、E5 種典型的沙門氏菌進行了檢測, 結果
表明對沙門氏菌純培養(yǎng)液的最低檢測量為1×104 CFU/mL,
且無交叉反應。陳鋼等[32]建立了檢測單增李斯特菌的
ELISA 法, 單核細胞增生李斯特菌檢測范圍為108~105
CFU/mL, 該研究建立的雙抗夾心檢測方法與金黃色葡萄
球菌和阪崎腸桿菌有較嚴重的交叉反應, 而與志賀氏菌和
沙門氏菌交叉反應不明顯。李建科等[33]建立了耐熱菌間接
競爭ELISA 快速檢測方法, LOD 為5×104 CFU/mL, 可在
24h 內給出果汁中耐熱菌是否超過1 CFU/10 mL 的檢測結
果, 滿足國內外果汁標準中耐熱菌不超過1 CFU/10 mL 的
檢測結果要求, 檢測時間比目前國內外普遍采用的
KFL(Krueger Food Laboratories)法縮短3~4 d, 檢測結果與
KFL 法完全相符。
ELISA法由于酶的催化效率很高, 可極大放大反應效
果, 使測定方法達到較高的靈敏度[34]。但是ELISA 法常出
現假陰性結果, 這可能與所用單克隆抗體的特異性有關,
因此需要設置陽性和陰性對照試驗[35]。ELISA 法與致病菌
傳統(tǒng)檢測法中的分離培養(yǎng)生化鑒定法相比[36], ELISA 檢測
不能作為最后的確證, 因為實際情況樣本分散以及樣本量
不均、監(jiān)管分散, 因此使用快速檢測可以先對樣本進行初
步篩選, 先篩選出可疑的樣本, 再對可疑的樣本進行分離
培養(yǎng), 從而提高檢測效率[37]。
2.4 生物毒素檢測
檢測生物毒素的方法有薄層層析法、微柱層析法、高
效液相色譜法和毛細管電泳法等。薄層層析法靈敏度低,
微柱層析法需要用其他的方法進行驗證, 高效液相色譜
法要求樣品的純度比較高, 樣品的前處理比較繁瑣, 操
作復雜, 儀器昂貴, 毛細管電泳成本比較高[38]。近年來出
現了許多新型的檢測新技術, 儀器分析法仍然是實驗室
檢測中最常用的方法。以免疫學為基礎的方法如ELISA
法由于其具有實驗周期短、設備簡單、操作簡便等特點而
被廣泛應用[39]。
Stachowiak 等[40]建立了檢測黃曲霉毒素B1 直接競爭
ELISA, 通過對單克隆抗體準確度的實驗確定了兩種單克
隆抗體, IC50 分別是0.037 ng/mL 和0.031 ng/mL。宋曉麗[41]
建立了檢測豬肉和雞肉中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇
(deoxynivaleno, DON)和T-2 毒素的直接競爭ELISA 法, 在
豬肉和雞肉樣本中DON 的LOD 分別為34.9 μg/kg 和43.5
μg/kg, 添加回收率為72.7%~97.1%, CV<8.7%; T-2 毒素的
LOD 分別為33.7 μg/kg 和28.7 μg/kg, 添加回收率為
72.1%~95.0%, CV<11.3%。王呂等[42]建立了基于噬菌體展
示技術的酶聯免疫吸附分析檢測赭曲霉毒素A(OTA)的方
法, IC50為(0.15±0.02) ng/mL, 線性范圍為0.03~0.50 ng/mL,
OTA 的LOD 為0.03 ng/mL, 無交叉反應, 批內加標回收率
為97.0%~115.2%, 批間加標回收率為107.2%~123.1%。
2.5 非法添加的非食用物質檢測
ELISA 作為一種經濟快速的檢測方法在食品中違法
添加的非食物質檢測中也有應用。孫鳳霞[43]利用獲得的單
克隆抗體建立了三聚氰胺的間接競ELISA 法并制備了試
劑盒, IC50 為(6±0.55) ng/mL, 奶粉LOD 為100 μg/kg, 液態(tài)
奶LOD 為20 ng/mL。奶粉樣品和液態(tài)奶樣品的添加回收
率分別為93%~101.9%和83.6%~96.9%, CV<10%, 完全滿
足三聚氰胺殘留檢測的實際要求。裘雪梅等[44]建立了檢測
蘇丹紅Ⅰ的直接競爭ELISA法, 線性范圍為0.5~10 ng/mL,
LOD 為0.1 ng/mL, 加標回收率為52.3%~110%, CV 為
3.2%~8.9%。貢東軍等[45]建立了間接競爭ELISA 法測定堿
性橙Ⅱ的含量, 采用戊二醛法將牛血清蛋白與堿性橙Ⅱ連
接為完全抗原, LOD 為0.01 ng/mL。
2.6 重金屬檢測
重金屬污染不僅能夠改變土壤的組成、功能和結構,
而且還會抑制作物根系生長和光合作用, 影響作物的正常
生長。重金屬還能夠通過食物鏈進入人體和動已經成為物
體內, 最終危害人體的健康[46]。重金屬難降解和持續(xù)污染
是當前重金屬殘留最為關注的問題, 重金屬的檢測方法主
要有原子吸收光譜法、原子熒光法、陽極溶出伏安法、催
化極譜法和電感耦合等離子體質譜法等[47], 這些方法不能
滿足快速檢測的要求, 而酶聯免疫吸附方法對于重金屬殘
留的檢測具有重要的研究意義[48]。
王津[49]建立了檢測重金屬鎘的間接競爭ELISA 法,
IC50 為4.18 μg/L, LOD 為0.38 μg/L, 除了與金屬汞螯合物
和鉻螯合物分別有10.6%和1.8%的交叉反應率外, 與其他
金屬螯合物的交叉反應率都小于0.3%。重金屬鎘的平均回
收率為90.54%~115.36%, CV 為1.35%~9.33%。翟一凡[50]
初步建立了Pb2+和Cr3+的間接競爭ELISA, 與其他重金屬
離子的交叉反應率均小于1%, LOD 為0.1 ng/mL, IC50 為5
ng/mL。Darwish 等[51]采用一步競爭ELISA(dc-ELISA)對環(huán)
境水樣中的Cd2+進行檢測, LOD 為0.3 μg/L, 水中常見的
Ca2+、Mg2+、Fe3+在相對高濃度下對檢測結果也無干擾。
Cd2+平均回收率為100.29%±3.60%, 批內CV 和批間CV 分
別為3.6%~10.9%和4.81%~10.21%。
2.7 過敏原檢測
食品中過敏原已經嚴重危及人們的生活, 這一食品
安全性指標也是一個需要高度關注的食品營養(yǎng)衛(wèi)生和食
品安全的問題[52]。目前臨床中治療過敏癥的最有效方法
是直接避免食用含有過敏源的食物, 這就要求生產廠家
在食品的標簽中直接標明食物中存在的過敏原成分, 避
免消費者因誤食而導致過敏。避免食物過敏的首要任務就
萬方數據
3976 食品安全質量檢測學報 第7 卷
是對食物進行過敏原檢測[53]。ELISA 已經廣泛應用于臨
床化學和食品分析中, 也是檢測食品中過敏原的一種快
速有效的方法[54]。
Shibahara 等[55]建立了對魚過敏原小清蛋白的雙抗夾
心ELISA 法, 這種方法使用抗太平洋鯖魚小清蛋白的多克
隆抗體, LOD 為0.23~0.70 μg/g, 添加回收率為
69.4%~84.8%, RSD<10.5%。Chen 等[56]建立了魚過敏原的
雙抗夾心ELISA 法檢測, LOD 為0.1 μg/g, 該方法的批間
CV 和批內CV 分別低于8.9%和9.3%, 該方法無假陽性和
假陰性, 沒有交叉反應。張潔瓊等[57]建立了檢測杏仁過敏
原苦杏仁球蛋白的雙抗體夾心ELISA 法, 甜杏仁中苦杏仁
球蛋白的LOD為(6.36±1.02) μg/L; 中國苦杏仁及美國大杏
仁中苦杏仁球蛋白的LOD 分別為(12.11±1.70) μg/L 和
(18.95±1.52) μg/L, 沒有交叉反應, 苦杏仁球蛋白的添加回
收率為78.94%~125.15%, RSD<5.81%。
ELISA 方法的準確性和特異性主要依賴于抗體識別
食物過敏原, 但某些食品工業(yè)常利用熱加工、超高壓和酶
解等深加工技術使過敏原蛋白發(fā)生變性和降解, 而蛋白質
結構的改變又可干擾蛋白提取物或抗體結合部位, 同時會
導致假陰性結果的出現。此外, 由于某些過敏原缺少特異
性的單克隆抗體, 無法利用ELISA 法進行檢測[58]。
2.8 轉基因檢測
顧 煒 煒 等 [59] 建立了用于檢測轉基因食品中
Btcry2Ab/2Ac 殺蟲蛋白的直接競爭ELISA, LOD 為40
ng/mL, 線性范圍40~2000 ng/mL, 回收率在
98.52%~102.27%。王新桐等[60]建立了高靈敏度定量檢測轉
基因棉花(Gossypium sp.)中新霉素磷酸轉移酶(NPTⅡ)雙
抗體夾心ELISA 法, 檢測范圍為3.370~108.125 ng/mL,
LOD 為1.97 ng/mL; 回收率為96.11%~104.69%; CV 為
6.58%~7.33%; 與非轉基因棉花內源蛋白質及其他種類轉
基因蛋白質均無交叉反應。呂雪飛等[61]建立了定量檢測轉
基因植物蛋白Cry1Ac 的雙抗體夾心ELISA 法, CV<3%,
LOD 為9.49 ng/mL, 對玉米樣品提取液中Cry1Ac 蛋白含
量的測定回收率為102.5%~103%。
檢測轉基因物質的雙抗體夾心ELISA 具備多克隆抗
體費用較低、單克隆抗體親和力高的特點, 使得后續(xù)研究
開發(fā)的試劑盒檢測成本低廉, 靈敏可靠, 而且可以穩(wěn)定、方
便地提供標準化試劑, 便于實現工業(yè)化生產。雙抗體夾心
ELISA 檢測方法的研究和建立, 為制備免疫膠體金試紙條
提供了便利, 為建立轉基因動物的現場、快速查驗技術打
下基礎, 所以這種檢測方法將成為轉基因檢測領域研究的
主要方向之一[62]。
3 結 論
ELISA 靈敏度高、特異性強、成本低, 設備簡單, 不
需要專業(yè)的人員操作, 是可以用于實驗室的快速檢測以及
擁有實驗室的其他部門或者企業(yè)進行快速檢測。但ELISA
也有不足, 如吸附方法需要一些基礎的儀器如恒溫箱、冰
箱、酶標儀等, 因此不適用于基層的現場快速檢測; 基于
酶聯免疫吸附方法的原理是抗原抗體的特異性結合, 一些
小分子物質需要與牛血清蛋白等大分子蛋白偶聯之后才有
免疫原性, 但并不是所有的小分子物質都能夠制出相應的
抗體; 另外, 還需考慮到待測物質結構類似物的干擾會影
響檢測的特異性及靈敏度, 不能滿足同時檢測多種物質的
要求[63]。
隨著蛋白質工程和基因工程的發(fā)展, 制備單克隆抗
體的技術越來越成熟, 會出現越來越多的ELISA 新技術。
ELISA 技術與氣相色譜(gas chromatography,GC)、聚合酶鏈
式反應(polymerase chain reaction,PCR)等技術的聯用, 會
有效地提高ELISA 技術的檢測效率[64]。ELISA 法需從以下
幾方面進一步完善: (1)研發(fā)具有高度免疫性的重組抗原提
高免疫原性; (2)將酶體外的定向進化應用到檢測中, 避免
與特異性抗體或抗原的交聯; (3)加強標準化, 促進ELISA
相關快檢產品商品化的應用。酶聯免疫的檢測方法從全手
動半自動到全自動發(fā)展, 目前還不是很成熟, 需進一步研
究。隨著對酶聯免疫吸附方法的研究, 靈敏度、精確度、
特異性、重復性會越來越好, 費用會逐步降低, ELISA 在食
品安全檢測方面將會得到進一步發(fā)展。
參考文獻
[1] 丁明, 鐘冬蓮, 湯富彬, 等. 固相萃取-高效液相色譜-串聯質譜聯用測
定竹筍中殘留的7 種殺蟲劑農藥[J]. 色譜, 2013, 31(2): 117?121.
Ding M, Zhong DL, Tang FB, et al. Determination of seven pesticides
residues in bamboo shoots by high performance liquid chromatographytandem
mass spectrometry coupled with solid-phase extraction [J]. Chin J
Chromatogr, 2013, 31(2): 117?121.
[2] 李月娟, 吳霞明, 王君. 食品分析及安全檢測關鍵技術研究[J]. 中國釀
造, 2012, 31(12): 13?17.
Li YJ, Wu XM, Wang J, et al. The research of key technology on food
analysis and security detection [J]. China Brew, 2012, 31(12): 13?17.
[3] 宋素泉. 重要違禁獸藥紅霉素和氯丙嗪的分子印跡聚合物的制備、表
征及在食品安全檢測中的應用[D]. 上海: 上海交通大學, 2008.
Song SQ. Preparation, characterization and application of molecularly
imprinted polymers toward key veterinary drugs of erythromycin and
chlorpromazine in food safety detection [D]. Shanghai: Shanghai Jiaotong
University, 2008.
[4] 宣偉, 王軍, 汪秀月,等. 食品安全檢測技術研究進展[J]. 肉類研究,
2011, 25(9): 47?51.
Xuan W, Wang J, Wang XY, et al. Progress in research on detection
techniques for food safety [J]. Meat Res, 2011, 25(9): 47?51.
[5] 劉聰, 祖文川, 汪雨. 環(huán)境水體中草甘膦農藥殘留的檢測方法進展[J].
現代科學儀器, 2015, 5: 37?55.
Liu C, Zu WC, Wang Y. Advances in analytical methods for determination
of glyphosate pesticide residue in environmental water [J]. Mod
SciInstrum, 2015, 5: 37?55.
[6] Engvall, Perlmann. Enzyme–linked immunosorbent assay (ELISA)
萬方數據
第10 期 馮 敏, 等: 酶聯免疫吸附法在食品安全性指標檢測中的研究進展 3977
quantitative assay of immunoglobulin G [J]. Immunchem, 1971, 8(9):
871?874.
[7] 林壯森, 張焜, 趙肅清, 等. 食品中生物毒素的ELISA 分析方法研究
進展[J]. 食品科學, 2009, 30(3): 281?283.
Lin ZS, Zhang K, Zhao SQ, et al. Research progress on ELISA method for
analysis of biotoxins in foodstuffs [J]. Food Sci. 2009, 30(3): 281?283.
[8] 石超, 呂常鑫, 馮敘橋, 等. 酶聯免疫吸附技術在食品檢測分析中的研
究進展[J]. 食品安全質量檢測學報, 2014, 5(10): 3269?3275.
Shi C, Lv CX, Feng XQ, et al. Advances in food determination and
analysis of enzyme-linked immunosorbent assay [J]. J Food Saf Qual,
2014, 5(10): 3269?3275.
[9] 吳鵬, 秦智偉, 周秀艷, 等. 蔬菜農藥殘留研究進展[J]. 東北農業(yè)大學
學報, 2011, 42(1): 138?144.
Wu P, Qin ZW, Zhou XY, et al. Research progress of pesticide residues in
vegetables [J]. J Northeast Agric Univ, 2011, 42(1): 138? 144.
[10] 王芳, 李道敏, 李兆周, 等. 食品中有機磷農藥殘留檢測方法的研究進
展[J]. 食品安全質量檢測學報, 2015, 6(9): 3587?3593.
Wang F, Li DM, Li ZZ, et al. Research advances on detection methods for
organophosphorus pesticides residue in food [J]. J Food Saf Qual, 2015,
6(9): 138?144.
[11] 麥昌青, 陳盛, 陳燕. 豇豆中有機磷和氨甲基酸酯類農藥殘留酶抑制
率快速檢測方法[J]. 現代農藥, 2016, 15(1): 41?43.
Mai CQ, Chen S, Chen Y. Rapid detection of organic phosphorus and
carbamate pesticides in cowpea by enzyme inhibition rate method [J].
Mod Agrochem, 2016, 15(1): 41?43.
[12] 陸小磊, 周衛(wèi)龍. 中國茶葉農藥殘留檢測方法標準概述[J]. 食品安全
質量檢測學報, 2015, 6(5): 1548?1553.
Lu XL, Zhou WL. Overview of Chinese determination standards of
pesticides residues in tea [J]. J Food Saf Qual, 2015, 6(5): 1548?1553.
[13] Otieno PO, Owuor PO, Lalah JO, et al. Comparative evaluation of ELISA
kit and HPLC DAD for the determination of chlorpyrifos ethyl residues in
water and sediments [J]. Talanta, 2013, (117): 250?257.
[14] Alexandra EB, Sergei AE, Angel M, et al. Development of
chemiluminescent ELISAs to DDT and its metabolites in food and
environmental samples [J]. J Immun Methods, 2003, (283): 45–57.
[15] 曾俊源, 崔巧利, 劉曙照. 直接競爭酶聯免疫吸附分析法測定桃氰戊
菊酯的殘留量[J]. 農藥學學報, 2014, 16(1): 61?65.
Zeng JY, Cui QL, Liu SZ. Determination of fenvalerate residue in peach
by direct competitive enzyme-linked immunosorbent assay [J]. Chin J Pest
Sci, 2014, 16(1): 61－65.
[16] 張忠梅. 獸藥殘留的危害及控制措施[J]. 山東畜牧獸醫(yī), 2015, (8):
83?84.
Zhang ZM. The damage of veterinary drug residues and control measures
[J]. Shandong J Anim Vet Sci, 2015, (8): 83?84.
[17] 何俊莎. 獸藥殘留危害及原因剖析[J]. 中國畜牧獸醫(yī)文摘, 2015, 31(8):
222.
He JS. The harm and reason of veterinary drug residue analysis [J]. Chin J
Anim Vet Sci, 2015, 31(8):222.
[18] 蔣小武. 淺析氟喹諾酮類獸藥殘留檢測方法[J]. 中國畜牧獸醫(yī)文摘,
2011, 27(3): 188?190.
Jiang XW. Analyze Fluoroquinolone veterinary drug residue detection
methods[J]. Chin J Anim Vet Sci, 2011, 27(3): 188?190.
[19] 王蕊, 廖笑萍, 劉雅虹. 氟喹諾酮類獸藥殘留檢測方法研究進展[J]. 廣
東農業(yè)科學, 2010, (10): 41?43.
Wang R, Liao XP, Liu YH. Advances in the study on the residue
determination of the veterinary drugs of fluoroquinolones [J]. Guangdong
Agric Sci, 2010, (10): 41?43.
[20] 劉冬梅.獸藥殘留酶聯免疫吸附試驗影響因素分析[J]. 甘肅畜牧獸醫(yī),
2015, 45(10): 69?70.
Liu DM. Veterinary drug residue enzyme-linked immunosorbent assay
influence factors analysis [J]. Gansu Anim Vet Sci, 2015, 45(10): 69?70.
[21] Cheng CC, Hsienh KH, Lei YC, et al. Development and residuescreening
of the furazolidone metabolite, 3-amino-2-oxazolidinone(AOZ), in
cultured fish by an enzyme-linked immunosorbent assay [J]. J Agric Food
Chem, 2009, 57(13): 5687?5692.
[22] Jiang WX, LuoPJ, Wang X, et al. Development of
anenzyme-linkedimmunosorbent assay for the detection of
nitrofurantoinmetabolite, 1-amino-hydantoin, in animal tissues [J]. Food
Control, 2012, 23: 20?25.
[23] 李亞楠, 王瑞, 李濤, 等. 直接競爭化學發(fā)光酶免疫法檢測呋喃妥因代
謝物[J] 食品科學, 2016, 36(8): 231?235.
Li YN, Wang R, Li T, et al. Detection of furantoin metabolite by direct
competitive chemiluminesceneenzyme immunoassay [J]. Food Sci, 2016,
36(8): 231?235.
[24] 王瑞, 呂月霞, 黃登宇, 等. 呋喃妥因代謝物化學發(fā)光酶聯免疫檢測方
法的研究[J]. 中國獸藥雜志, 2015, 49(4): 35?41.
Wang R, Lv YX, Huang DY, et al. study of chemiliminescent enzyme
immunoassay method for nitrofurantoin metabolite [J]. J ChinVet Med,
2015, 49(4): 35?41.
[25] 李亞楠, 王瑞, 孫元媛, 等. 直接競爭酶聯免疫法測定呋喃妥因代謝物
[J].食品安全質量檢測學報 2015, 6(9): 3723?3729.
Li YN, Wang R, Sui YY, et al. Determination of nitrofurantion metabolite
by direct competitiveenzyme-linked immunosorbent assay [J]. J food Saf
Qual, 2015, 6(9): 3723?3729.
[26] Liu YC, Jiang W, Chen YJ,et al. A novel chemiluminescent ELISA for
detecting furaltadonemetabolit3-amino-5-morpholinomethyl-2-oxazo- lidone
(AMOZ) in fish, egg, honey and shrimp samples [J]. J Immun Methods,
2013, (395): 29–36.
[27] 任海濤, 沈玉棟, 徐振林, 等. 呋喃西林代謝物多克隆抗體制備及酶聯
免疫吸附分析方法[J]. 食品工業(yè)科技, 2012, 33(5): 330?370.
Ren HT, Sheng YD, Xu ZL, et al. Production and identification of
polyclonal antibody detect nitrofurazonemetabolite and development of
enzyme-linked immunosorbent assay [J]. Sci Technol Food Ind, 2012,
33(5): 330?370.
[28] 閆葉娜. 呋喃西林代謝物單克隆抗體的制備及其免疫分析方法的建立
[D]. 南京: 南京農業(yè)大學, 2010.
Yan YN. Preparation of monoclonal antibody fornitrofurazone and
development of its immunity analysis [D]. Nanjing: Nanjing Agriculture
University, 2010.
[29] 李敏, 何小維. 間接競爭ELISA 法檢測呋喃唑酮代謝物[J]. 現代食品
科技, 2012, 28(4): 476?479.
Li M, He XW. Indirect competitive ELISA method to detect furazolidone
metabolites [J]. Mod Food Sci Technol, 2012, 28(4): 476?479.
[30] Xu YG, Cui LC, Tian CY, et al. A multiplex polymerasechain reaction
coupled with high-performance liquid chromatography assay for
simultaneous detection of six foodborne pathogens [J]. Food Control, 2012,
萬方數據
3978 食品安全質量檢測學報 第7 卷
25(2): 778?783.
[31] 伍燕華, 牛瑞江, 賴衛(wèi)華, 等. 雙抗夾心酶聯免疫吸附法檢測沙門氏菌
[J]. 食品工業(yè)科技, 2014, 35(10): 62?65.
Wu YH, Niu RJ, Lai WH, et al. Detection of Salmonella by double
antibody sandwich ELISA [J]. Sci Technol Food Ind, 2014, 35(10): 62?65.
[32] 陳鋼. 單增李斯特菌酶聯免疫吸附法的研究[D]. 南昌: 南昌大學,
2010.
Chen G. Study on enzyme-linked immuno-sorbent assay of Listeria
monocyogenes [J]. Nanchang: Nanchang University, 2010.
[33] 李建科, 王峰, 夏凱. 蘋果濃縮汁中耐熱菌的間接ELISA 快速檢測方
法[J]. 中國農業(yè)科學, 2011, 44(24): 24669?4677.
Li JK, Wang F, Xia K. An indirect and accurate ELISA for detection
ofAlicyclobacillusacidoterrestrisin apple juice concentrate [J].Sci Agric
Sin, 2011, 44(22): 4669?4677.
[34] 張也, 劉以祥. 酶聯免疫技術與食品安全快速檢測[J]. 食品科學, 2008,
24(8): 200?204.
Zhang Y, Liu YX. Rapid determination of enzyme-linked immunosorbent
assay on food safety [J]. Food Sci, 2008, 24(8): 200?204
[35] 錢程, 馬晨, 湯永嬌, 等. 果蔬中食源性致病微生物的研究進展[J]. 熱
帶農業(yè)科技, 2014, 34(12): 85?93.
Qian C, Ma C, Tang YJ, et al. Research progress of foodborne pathogenic
microorganism research in fruits and vegetables [J]. Trop Agric Sci
Technol, 2014, 34(12): 85?93.
[36] 陳玉婷, 程楠, 許文濤. 食源性致病微生物的檢測新技術[J]. 食品安全
質量檢測學報, 2015, 6(9): 3405?3413.
Chen YT, Chen N, Xu WT. Novel technologies for foodborne pathogenic
microorganism detection [J]. J Food Saf Qual, 2015, 6(9): 3405?3413.
[37] 魏子淏, 李汴生. 食品性致病微生物的快速檢測方法及其研究現狀[J].
現代食品科技, 2013, 29(2): 438?451.
Wei ZH, Li BS. Reviews of rapid detection methods for foodborne
pathogenic microorganisms [J]. Mod Food Sci Technol, 2013, 29(2):
438?451.
[38] 林壯森, 張焜, 趙肅清, 等. 食品中生物毒素的ELISA 分析方法研究
進展[J]. 食品科學, 2009, 30(3): 281?283.
Lin ZS, Zhang K, Zhao SQ, et al. Research progress on ELISA method for
analysis of biotoxins in foodstuffs [J]. Food Sci, 2009, 30(3): 281?283.
[39] 李少暉, 任丹丹, 謝云峰, 等. 食品中黃曲霉毒素檢測方法研究進展[J].
食品安全質量檢測學報, 2015 ,6(4): 1107?1115.
Li SH, Ren DD, Xie YF, et al. Research progress on determination
methods of aflatoxins in foodstuffs [J]. J Food Saf Qual, 2015, 6(4):
1107?1115.
[40] Stachowiak MO, NerminSajic, Xu Y, et al. Fast and sensitive aflatoxin B1
and total aflatoxins ELISAs for analysis of peanuts, maize and feed
ingredients [J]. Food Control, 2016, (63): 239?245.
[41] 宋曉麗, 劉梅軒, 羅湘蜀, 等. 豬肉和雞肉中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇和
T-2 毒素酶聯免疫吸附檢測方法的建立[J]. 中國畜牧獸醫(yī), 2015, 42(3):
525?530.
Song XL, Liu MX, Luo XS, et al. Development of an enzyme-linked
immunosorbent assay for the detection of deoxynivalenol and T-2 toxin in
pork and chicken [J]. China Anim Husb Vet Med, 2015, 42(3): 525?530.
[42] 王呂, 熊斯誠, 鄒旭強, 等. 赭曲霉毒素A模擬抗原表位及噬菌體展示
酶聯免疫吸附分析法的建立[J]. 分析化學, 2015, 43(6): 856?861.
Wang L, Xiong SC, Zhou XQ, et al. Mimic epitope of ochratoxina and its
application in phage enzyme-linked immunosorbent assay [J]. Chin J Anal
Chem, 2015, 43(6): 856?861.
[43] 孫鳳霞. 三聚氰胺單克隆抗體制備及其高靈敏快速檢測技術研究[D].
無錫: 江南大學, 2011.
Sun FX. Study on preparation of melamine monoclonal antibody and
high-sensitive and rapid detection methods [D]. Wuxi: Jiangnan University,
2011.
[44] 裘雪梅, 劉仁榮, 徐玲, 等. 蘇丹紅Ⅰ單克隆抗體的制備及其間接競爭
ELISA 檢測[J]. 食品科學, 2010, 31(18): 258?261.
Qiu XM, Liu RR, Xu L, et al. Monoclonal antibodies against sudan I:
preparation of and application in indirect competitive ELISA detection [J].
Food Sci, 2010, 31(18): 258?261.
[45] 貢東軍, 趙志磊, 王庭欣, 等. 堿性橙II 的酶聯免疫檢測方法的研究[J].
食品研究與開發(fā), 2013,34(10): 80?82.
Dong J, Zhao ZL, Wang TX, et al. Study on the ELISA determination of
chrysoidin II [J]. Food Res Dev, 2013, 34(10): 80?82.
[46] 宋偉, 陳百明, 劉琳. 中國耕地土壤重金屬污染概況[J]. 水土保持研究,
2013, 20(2):293?298.
Song W, Chen BM, Liu L. Soil heavy metal pollution of cultivated land in
China [J]. Res Soil Water Conserv, 2013, 20(2): 293?298.
[47] 王玉紅, 王延風, 陳華. 海水中重金屬檢測方法研究及治理技術探索
[J]. 環(huán)境科學與技術, 2014, 37(6): 237?241．
Wang YH, Wang YF, Chen H.The study progress of detection methods of
heavy mental in sea and exploration of management control [J]. Environ
Sci Technol, 2014, 37(6): 237?241.
[48] 車曉青,郭明. 重金屬殘留的酶聯免疫吸附檢測技術研究進展[J]. 福建
分析測試, 2009, 18(4): 61?66.
Che XQ, Guo M. Recent progress of enzyme-linked immunosorbent assay
technique for heavy metal residues [J]. Fujian Anal Test, 2009, 18(4):
61?66.
[49] 王津. 重金屬鎘免疫檢測方法的研究[D]. 天津:天津科技大學, 2012
Wang J. Development of immunoassay for the determination of cadmium
[D]. Tianjin: Tianjin University of Science and Technology, 2012.
[50] 翟一凡. 重金屬鉛和鉻單克隆抗體的制備及免疫學檢測方法的初步建
立[D]. 廣州: 暨南大學, 2010
Zhai YF. Preparation and estblished primary immunoassay of monoclonal
antibodies against ion lead and chromiu [D]. Guangzhou:Jinan University,
2010.
[51] Darwish IA, Blake DA. One-step competitive immunoassay for Cadmium
ions:development and validation for environmental water samples [J].
Anal Chem, 2001, 73: 1889?1895．
[52] 謝秀玲, 李欣, 高金燕, 等. 非熱加工對食物過敏原影響的研究進展[J].
食品科學, 2014, 43(17): 344?349.
Xie XL, Li X, Gao JY, et al. A review of studies on the effect of
non-thermal processing on food allergens [J]. Food Sci, 2014, 43(17):
344?349.
[53] 鄭義成, 華萍, 楊安樹, 等. 食物中過敏原檢測技術研究進展[J]. 食品
科學, 2010, 31(21): 417?421.
Zheng YC, Hua P, Yang AS, et al. Research advance in detection
technologies for allergen in food [J]. Food Sci, 2010, 31(21): 417?421.
[54] Immer U, Lacorn M. 10–Enzyme-linked immunosorbent assays (ELISAs)
for detecting allergens in food [J]. Handbook Food Allerge Detect Control,
2015: 199–217.
萬方數據
第10 期 馮 敏, 等: 酶聯免疫吸附法在食品安全性指標檢測中的研究進展 3979
[55] Shibahara Y, Uesaka Y, WangJ, et al. A sensitiveenzyme-linked
immunosorbent assay for the determination of fish protein in processed
foods [J]. Food Chem, 2013, (136): 675–681.
[56] Chen YT, Yun-Hwa Peggy Hsieh. A sandwich ELISA for the detection of
fish and fish products [J]. Food Control, 2014, (140): 265?273.
[57] 張潔瓊, 高淑霞, 生威, 等. 雙抗體夾心酶聯免疫吸附法檢測杏仁過敏
原苦杏仁球蛋白[J]. 食品科學,2013, 34(16): 173?177.
Zhang JQ, Gao SX, Sheng W, et al. Development of double-antibody
sandwich ELISA for the detection of the almond allergen amandin [J].
Food Sci, 2013, 34(16): 173?177.
[58] 陳穎, 王瑋. 食物過敏原檢測方法研究進展[J]. 檢疫檢驗學刊, 2011,
21(3): 4?7．
Chen Y, Wang W. Inspection and quarantine science [J]. Inspect
QuarantSci, 2011, 21(3): 4?7.
[59] 顧煒煒, 潘家榮. 轉基因食品中Btcry2Ab/2Ac 殺蟲蛋白直接競爭
ELISA 試劑盒的研制[J]. 食品科技, 2007, (6): 203?206.
Gu WW, Pan JR. Development of the detection of ELISA kit for
Btcry2Ab/2Ac insecticidal protein in transgenic food [J]. Food Sci
Technol, 2007, (6): 203?206.
[60] 王新桐, 孫佳芝, 高麗麗, 等. 轉基因棉花中新霉素磷酸轉移酶
(NPTⅡ)雙抗體夾心 ELISA 定量檢測方法的建立[J]. 農業(yè)生物科技學
報, 2014, 22(3): 372?379.
Wang XT, Sun JZ, Gao LL, et al. Development of monoclonal antibodybased
sandwich ELISA for detection of neomycin phosphotransferase
(NPT Ⅱ)protein in genetically modified cotton(Gossypium sp.) [J]. J Agric
Biotechnol, 2014, 22(3): 372?379.
[61] 呂雪飛, 周曉萍, 滿燕, 等. 定量檢測轉基因植物蛋白Cry1Ac 的雙抗
體夾心ELISA 方法建立[J]. 現代食品科技, 2014, 30(10): 257?262.
Lv XH, Zhou XP, Mang Y, et al. Double-antibody sandwich ELISA for the
quantitative detection of Cry1Ac protein in transgenic plants [J]. Mod
Food Sci Technol, 2014, 30(10): 257?262.
[62] 薛振華, 史文清, 王曉鳳, 等. 雙抗體夾心ELISA 在轉基因生物檢測
中的應用研究[J]. 安徽農業(yè)科學, 2014,42(12): 3476?3540.
Xue ZH, Shi QW, Wang XF, et al. Application of double antibody
sandwich ELISA method in testing genetically modified organisms [J]. J
Anhui Agric Sci, 2014, 42(12): 3476?3540.
[63] 張強. ELISA 技術在食品安全檢測中的應用研究進展[J]. 長江大學學
報(自然科學版), 2015, 12(33): 45?49.
Zhang Q. The application and study advance of ELISA in food safety
detections [J]. J Yangtze Univ (Nat Sci Ed), 2015, 12(33): 45?49.
[64] 何紫薇, 郭琦. 酶聯免疫吸附(ELISA)技術在食品檢驗的發(fā)展應用[J].
科協(xié)論壇:下半月, 2011, (11): 380?381.
He ZW, Guo Q. Research progress of ELISA in food safety detection [J].
Sci Technol Ass Forum, 2011, (11): 380?381.
(責任編輯: 姚菲)
作者簡介
馮 敏, 碩士, 主要研究方向為食品
質量與安全。
E-mail: 15135101066@163.com
黃登宇, 博士, 副教授, 碩士生導師,
主要研究方向為食品衛(wèi)生檢測。

網友評論 more

食品安全論文最新內容

06-30